Studies on the mechanism of entry of the envelope virus and its inhibitor.

包膜病毒及其抑制剂的侵入机制研究。

基本信息

批准号：
16580236
负责人：
OKAZAKI Katsunori
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Health Sciences University of Hokkaido (2005)Hokkaido University (2004)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16580236/
关键词：
Virus envelope Membrane fusion Cell entry Herpesviru gB glycoprotein Proteolytic enzyme Endothelial cells Endosome ヘプタドリピート gB 糖蛋白フリン

项目摘要

Glycoprotein B (gB) is the most conserved glycoprotein of herpesviruses and plays important roles in virus infectivity. The glycoprotein of most herpesviruses, including psuedorabies virus (PrV), is cleaved by a cellular protease into two disulfide-linked subunits. In the present study, we demonstrated that the glycoprotein generated in human colon carcinoma Lo Vo cells, which lack the ubiquitous protease furin, remained the uncleaved form and that the virus replicated in Lo Vo cells without cell fusion. The uncleaved gB was converted into the subunits after furin digestion. The virus also replicated in Madin-Darby bovine kidney cells in the presence of a peptide furin inhibitor without cell fusion although distinguished syncytia were formed in the absence of the inhibitor. Lo Vo cells constitutively expressing furin showed cell fusion when they were infected with the virus. The penetration kinetics assays revealed that the virus carrying uncleaved gB penetrated the cells at the same rate as that carrying cleaved gB. These results indicate that PrV gB was cleaved by furin and that the cleavage was dispensable for virus replication in vitro. gB cleavage was involved in syncytium formation but not in penetration kinetics, suggesting that different mechanisms operated between cell-cell fusion and virus-cell fusion by PrV.Electron microscopic examination at the stage of entry of equine herpesvirus 1 (EHV-1) showed that viral particles were present within uncoated vesicles in the cytoplasm of equine brain microvascular endothelial cells (EBMECs). Although herpesviruses are thought to enter the cells on the plasma membrane, these results might show that EHV-1 enter EBMECs through endosome.

糖蛋白B（gB）是疱疹病毒中最保守的糖蛋白，在病毒感染性中发挥重要作用。大多数疱疹病毒（包括伪狂犬病病毒 (PrV)）的糖蛋白被细胞蛋白酶切割成两个二硫键连接的亚基。在本研究中，我们证明，缺乏普遍存在的弗林蛋白酶的人结肠癌 Lo Vo 细胞中产生的糖蛋白保持未切割的形式，并且病毒在 Lo Vo 细胞中复制而无需细胞融合。未切割的 gB 在弗林蛋白酶消化后转化为亚基。该病毒还在肽弗林蛋白酶抑制剂存在的情况下在 Madin-Darby 牛肾细胞中复制，但没有细胞融合，尽管在不存在抑制剂的情况下形成了明显的合胞体。组成型表达弗林蛋白酶的Lo Vo细胞在感染病毒时表现出细胞融合。渗透动力学分析表明，携带未切割的 gB 的病毒以与携带切割的 gB 相同的速度渗透细胞。这些结果表明PrV gB被弗林蛋白酶切割并且该切割对于病毒体外复制是不必要的。 gB 裂解参与合胞体形成，但不参与渗透动力学，表明 PrV 的细胞-细胞融合和病毒-细胞融合之间存在不同的机制。马疱疹病毒 1 (EHV-1) 进入阶段的电子显微镜检查表明：病毒颗粒存在于马脑微血管内皮细胞（EBMEC）细胞质中未包被的囊泡内。尽管疱疹病毒被认为是通过质膜进入细胞，但这些结果可能表明 EHV-1 通过内体进入 EBMEC。

项目成果

期刊论文数量（38）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The amino-terminat residue of glycopeotein B is critical for neutralization of bovine herpesvirus 1

糖蛋白 B 的氨基末端残基对于中和牛疱疹病毒 1 至关重要

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Virus Res. (印刷中)
影响因子：
0
作者：
S.Ieiri;T.Nomura;H.Hirooka;M.Satoh;K.Okazaki
通讯作者：
K.Okazaki

Differential susceptibility of equine and mouse brain microvascular endothlial cells to equine herpesvirus 1 infection.

马和小鼠脑微血管内皮细胞对马疱疹病毒1感染的不同易感性。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Archives of Virology 151
影响因子：
0
作者：
Fujiwara;A.;T.Nomura;Noriko Shibata et al.;Ushizawa et al.;R.Hasebe et al.
通讯作者：
R.Hasebe et al.

牛伝染性鼻気管炎(動物の感染症<第二版>)

牛传染性鼻气管炎（动物传染病<第2版>）

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
Mika Masaki;Chihiro Koshimoto;Kimiyuki Tsuchiya;Aya Nishiwaki;Tetsuo Morita;岡崎克則
通讯作者：
岡崎克則

ヘルペスウイルスの病原性発現機構

疱疹病毒致病性表达机制

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
日本臨床 64
影响因子：
0
作者：
Murasawa M;Takahashi T;Nishimoto H;Yamamoto S;Hamano S;Tetsuka M;Takurou Hirano et al.;T.Honda;Ushizawa et al.;Acosta TJ et al.;岡崎克則
通讯作者：
岡崎克則

悪性カタル熱(動物の感染症<第二版>)

恶性卡他热（动物传染病<第2版>）