マクロファージレセプターに強く認識される標識化リピドAの設計と合成

巨噬细胞受体强烈识别的标记脂质A的设计与合成

基本信息

批准号：
09273241
负责人：
及川雅人
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09273241/
关键词：
リピドA 蛍光標識光親和性標識 ^<13>C標識配座解析

项目摘要

リピドAはグラム陰性菌の細胞表層の構成成分リポ多糖の末端部分構造で、リポ多糖が示すエンドトキシン活性の本体である。リピドAが人に対して示す生理活性は、血中の大食細胞の表層のレセプターに認識されることで免疫系が活性化されて引き起こされる。本研究ではリピドAの大食細胞上での挙動を観測するために蛍光標識化誘導体の合成を試みている。合成はアリル系の保護基を用いることにより行い、最終段階で蛍光標識を導入することを計画したが、実際には蛍光標識を導入したのちのリン酸化が進行しない問題が生じ、現在は合成経路の変更を行っている。その経路は合成の早い段階でリン酸化を行ってしまうというもので、その経路による合成は現在最終段階を迎えている。この経路による蛍光標識体の合成が完成したのちには同じ位置に光親和性標識化を施した類縁体の合成を行う。一方、リポ多糖の生合成前駆体はリピドAと共通の構造単位から成っているものの、リポ多糖の活性に対する拮抗阻害を示す。この生合成前駆体の溶液配座を決定するために一部の炭素を^<13>Cで標識した化合物2種類の合成を行った。合成品のNMRを解析することにより、ミセル水溶液中での配座とその会合状態の解析に成功した。さらに拮抗阻害を示さない生合成前駆体類縁体の^<13>C標識化も行い、それらのNMRが互いに異なっていることを見出した。その配座の違いは活性の違いに関係があるものと思われる。

脂质A是脂多糖的末端结构，脂多糖是革兰氏阴性菌细胞表面的成分，负责脂多糖表现出的内毒素活性。当血液中巨噬细胞表面的受体识别脂质 A 时，免疫系统就会激活，从而触发人体脂质 A 的生理活性。在本研究中，我们尝试合成脂质A的荧光标记衍生物来观察其对巨噬细胞的行为。使用烯丙基保护基进行合成，计划在最后一步引入荧光标记，但实际上，出现了引入荧光标记后磷酸化不进行的问题，目前合成路线正在改变。该途径涉及合成早期阶段的磷酸化，并且通过该途径的合成目前处于最后阶段。通过该途径合成荧光标记物质后，在相同位置合成光亲和标记的类似物。另一方面，虽然脂多糖的生物合成前体由脂质A共有的结构单元组成，但它表现出对脂多糖活性的竞争性抑制。为了确定该生物合成前体的溶液构象，我们合成了两种类型的化合物，其中一些碳被^ 13 C标记。通过分析合成产物的NMR，我们成功分析了胶束水溶液中的构象和缔合状态。我们还对不显示竞争性抑制的生物合成前体类似物进行了 13 C标记，并发现它们的NMR彼此不同。构象的差异似乎与活性的差异有关。