MHC結合性ペプチドモチーフを応用した免疫学的分子擬態の解析

应用 MHC 结合肽基序的免疫分子模拟分析

• 批准号: 09271221
• 负责人: 松下 祥
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09271221/
• 关键词: 主要組織適合抗原; ペプチド; class II HLA; 自己免疫病; 部分アゴニスト; 寿命延長; 免疫学的記憶; 分子擬態

本研究は、我々によって明らかにされたHLA-ペプチド及びTCR-TCTリガンドの結合に関する法則性を利用することにより、ヒト成熟T細胞における免疫学的分子擬態の生理的、病理的意義を解明することを目的とした。そのために先ず、BCGa蛋白の第84-100残基(EEYLILSARDVLAVVSK)をHLA-DR14拘束性に認識する3種類のヒトTh0クローンBC20.7,BC33.5,およびBC42.1を樹立した。1残基置換アナログペプチド、および交叉反応性を示す可能性のある自己ペプチドをデータベースより検索して合成し、それを用いて抗原提示細胞(APC)の存在下にT細胞クローンを刺激し、その応答を観察した。また、クローン化されたT細胞のみならず、末梢血T細胞レベルでもpartial agonismやTCR antagonismが存在することを確認するために、すべてのポジションが19種類の残基から構成される9-19merのdegenerate peptides(X9,X11,X13,X15,X17,X19)を合成し、PBMCに対するそれら自体の刺激効果、ならびにpolyclonalな末梢血T細胞応答に対する効果を観察した。その結果、(1)第93残基AspをTyrに置換したアナログペプチドD93Y、および自己コネキシン26ペプチド断片(IMILVVAAKEVWGDEQA)は、それ自体では増殖誘導活性を示さなかったが、サイトカイン産生を誘導すると同時に、in vitroでそれぞれBC33.5およびBC20.7の寿命をクローン特異的に延長させた。この現象に伴って、Bcl-xLの発現増強が認められた。(2)Xnペプチドは、末梢血T細胞に対してpartial agonism活性を有しており、同時にpolyclonalな応答に対するantagonism活性も有していた。これらの結果より、成熟T細胞レベルでも部分アゴニストペプチドによる寿命延長は起こりうる、すなわちpositive selectionは胸腺外でも継続的に起こりうると考えられた。

本研究旨在利用我们已揭示的 HLA 肽与 TCR-TCT 配体的结合规则，阐明人类成熟 T 细胞中免疫分子拟态的生理学和病理学意义。为此，我们首先建立了三个人类Th0克隆，BC20.7、BC33.5和BC42.1，它们以HLA-DR14限制性方式识别BCGa蛋白(EEYLILSARDVLAVVSK)的残基84-100。从数据库中搜索并合成可能表现出交叉反应性的单残基取代类似物肽和自身肽，并用于在抗原呈递细胞（APC）存在的情况下刺激T细胞克隆，观察反应。此外，为了证实部分激动和TCR拮抗作用不仅存在于克隆的T细胞中，而且还存在于外周血T细胞水平上，我们构建了所有位置均由19种残基组成的9-19mer。简并肽（X9，结果，（1）类似物肽D93Y（其中Asp残基93被Tyr取代）和自连接蛋白26肽片段（IMILVVAAKEVWGDEQA）本身不表现出增殖诱导活性，但同时它们诱导细胞因子的产生分别在体外实现了 BC33.5 和 BC20.7 的克隆特异性延长。伴随这一现象，还观察到 Bcl-xL 的表达增强。 (2)Xn肽对外周血T细胞具有部分激动活性，同时对多克隆反应也具有拮抗活性。这些结果表明，部分激动剂肽诱导的寿命延长甚至可以在成熟T细胞水平上发生，也就是说，正选择可以在胸腺外继续发生。

项目成果

Matsushita, S.et al.: "Evidence for self-and non-self-peptide partial agonists that prolong clonal survival of mature T cells in vitro" J.Immunol.158. 5685-5691 (1997)

Matsushita, S.et al.：“自身和非自身肽部分激动剂延长成熟 T 细胞体外克隆存活的证据”J.Immunol.158。

Oiso, M.et al.: "Differential peptide binding to HLA-DQ8 and DQ9 differing only at DQ β57" Hum.Immunol.52. 47-53 (1997)

Oiso, M.等人：“与 HLA-DQ8 和 DQ9 的差异肽结合仅在 DQ β57 处不同”Hum.Immunol.52 (1997)。

Matsushita, S.et al.: "Molecular and genetic approaches to diseases" HLA-peptide complex and diseases, in press

Matsushita, S.et al.：“疾病的分子和遗传学方法”HLA-肽复合物和疾病，正在出版

Tanaka, Y.et al.: "Leukocyte Typing VI" Effect of mAbs to T-cell and adhesion structures on a proliferative response of a CD4_+ T cell clone with a paracrine growth property, 111 (1997)

Tanaka, Y.等人：“白细胞分型 VI”单克隆抗体对 T 细胞和粘附结构对具有旁分泌生长特性的 CD4_ T 细胞克隆的增殖反应的影响，111 (1997)

Fujita, H.et al.: "Evidence for human CD4_+ T cell clones specific to p53 cryptic self peptides and responding to p53 proteins of both wild and mutant forms" Eur.J.Immunol.28. 305-316 (1998)

Fujita, H.等人：“对 p53 隐性自肽具有特异性并对野生和突变形式的 p53 蛋白作出反应的人 CD4_T 细胞克隆的证据”Eur.J.Immunol.28。