光形態形成を制御する核内タンパク質複合体の解析

控制光形态发生的核蛋白复合物的分析

基本信息

批准号：
09251218
负责人：
松井南
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09251218/
关键词：
光形態形成 COP1遺伝子 Athb-2遺伝子

项目摘要

1)相互作用タンパク質の検索COP1タンパク質とin vitroで相互作用するタンパク質として単離しているCIP7タンパク質遺伝子は、光によって発現が誘導される遺伝子であり、またcop1変異株では、暗条件でも発現が観察されることからCOP1遺伝子の下流に位置すると考えられた。また、この遺伝子をアンチセンスで発現した形質転換した植物では、cab,rbcSといった光誘導性遺伝子の発現がともに減少していることからこのタンパク質は、光誘導性遺伝子の転写活性化因子として働いていることが示唆された。またこのことは、この遺伝子とGAL4のDNA結合領域を結合して、GAL4認識部位をプロモーター領域に持つGUSレポーターを用いたin vitroの実験系の酵母細胞中や、植物での一過的な発現実験でもこの遺伝子が転写活性化因子として働くという結果が得られた。2)既存遺伝子との相互作用胚軸の伸長に関与していると考えられるAthb-2遺伝子がCOP1遺伝子とどのような関係にあるかを解析した。この遺伝子は野性株において明所に比べて暗所で発現が観察された。しかしcop1変異株においては、暗所における発現が減少していた。この事は、Athb-2遺伝子がCOP1遺伝子の制御下にあることを示唆していた。この遺伝子は、形質転換植物の研究から胚軸伸長に関係していることが示唆されている。そこで暗所における胚軸伸長率と遺伝子の発現形式について調べてみたが、伸長率の極大になる発芽後、2,3日において発現の増大は見られず、7日間を通じて一定であった。この事はこの遺伝子が暗所における胚軸伸長よりも、近赤外光による胚軸の徒長に関係していることが示唆された。

1) 寻找相互作用蛋白 CIP7蛋白基因作为在体外与COP1蛋白相互作用的蛋白被分离出来，是一种通过光诱导表达的基因，在cop1突变株中，即使在黑暗下也观察到表达因此，它被认为位于 COP1 基因的下游。另外，在该基因反义表达的转化植物中，cab和rbcS等光诱导基因的表达均减少，表明该蛋白质作为光诱导基因的转录激活剂发挥作用。是。这也表明，通过将该基因与 GAL4 的 DNA 结合区连接，可以使用在其启动子区域中具有 GAL4 识别位点的 GUS 报告基因在体外实验系统中的酵母细胞中表达，或者在植物实验中表达该基因。还表明该基因充当转录激活剂。 2）与现有基因的相互作用我们分析了被认为与下胚轴伸长有关的Athb-2基因和COP1基因之间的关系。观察到该基因在野生菌株中在黑暗中比在光中表达更多。然而，在 cop1 突变体中，黑暗中的表达减少。这表明Athb-2基因受到COP1基因的控制。对转化植物的研究表明该基因参与下胚轴伸长。因此，我们研究了黑暗中下胚轴伸长率和基因表达模式，但在发芽后2或3天，当伸长率达到最大值时，没有观察到表达增加，并且在整个7天内保持恒定。这表明该基因参与近红外光下的下胚轴伸长，而不是黑暗下的下胚轴伸长。