海馬CAI錐体細胞NMDAレセプター活性化に働く神経回路メカニズムの研究

影响海马CAI锥体细胞NMDA受体激活的神经环路机制研究

基本信息

批准号：
04246217
负责人：
玉巻伸章
金额：
$ 0.83万
依托单位：
福井医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04246217/
关键词：
NMDAレセプター海馬 CAI CA3 錐体細胞

项目摘要

海馬のスライスでよく研究されているLTPの形成錐持の研究の流れにおいて欠落した領域がある。LTPの形成にはNMDA receptorの活性化が必要であるが、いずれの実験においても、活性化のための脱分極は、人為的刺激ないしは細胞内通電によっている。生体内に於いてこの脱分極が如何にして形成されるかを調べることは、海馬の役割及び仕組みを考える上で欠くことが出来ない。具体的には、CA3錐体細胞どうしが、同期活動現象に重要な働きをする連合線維の、何個のシナプスによって結合しているかを形態学的に調べる。次にCA3錐体細胞とCA1錐体細胞が何個のシナプスで結合しているかを調べ、同期活動し得るCA3錐体細胞の数と、unitEPSPから、CA1錐体細胞に起こり得る脱分極の大きさを見積ることにあった。この目的のために、複数神経細胞を同時に違った物質で染色し、二つの神経細胞のつながりを、光顕電顕両レベルで観察する技術が必要である。Neurobiotinを単一の神経細胞に注入し、Co-DAB反応で黒色に標識する。次に複数の神経細胞にLucifer Yellowを注入し、Avidin Biotincomplexを付け、DAB反応で褐色に標識する、以上の手順によって、一個の錐体細胞からの軸索はBiocytinで黒色に標識され、他の錐体細胞は主に樹状突起がHRPで褐色に標識される。この方法で錐体細胞どうしのシナプス結合の数を確認することを試みて来た。海馬の錐体細胞の樹状突起と軸索は、スパインを介してシナプスを形成するので、光学顕微鏡レベルでは、樹状突起と軸索の接触という形では捕らえられないという問題点が、明らかになってきたが、光顕により樹状突起と軸索の近接を、各々の錐体細胞で勘定すれば、過大評価する事はあっても過少評価する事はないとおもわれるので、光顕でも一定の概算が可能と考え、現在この法方でデータを収拾中である。

研究流入LTP形成的金字塔的研究中缺少某些区域，这在海马切片中进行了很好的研究。 NMDA受体的激活是LTP的形成所必需的，但是在任何实验中，通过人工刺激或细胞内能量来完成激活的去极化。检查这种去极化是如何在体内发生的，对于考虑海马的作用和机制至关重要。具体而言，我们研究了形态学上有多少CA3锥体细胞的突触中的缔合纤维连接在一起，这些突触在同步活性现象中起着重要作用。然后，我们研究了有多少突触CA3锥体细胞和CA1锥体细胞连接，并估计可以同步的CA3锥体细胞的数量，以及来自UnitePSP的CA1锥体细胞中可能发生的去极化幅度。为此，必须拥有一种技术，其中多个神经细胞同时用不同的物质染色，并观察两个神经元之间的连接。神经生物素被注入单个神经元中，并在共键型反应中标记为黑色。接下来，将多个神经元注入Lucifer黄色，并应用Avidin Biotincomplex，并在DAB反应中标记棕色标记。通过上述过程，来自一个锥体细胞的轴突将黑色标记为黑色，其他锥体细胞主要用HRP标记为棕色。我们试图以这种方式确定锥体细胞之间的突触连接数量。由于海马形式中锥体细胞的树突和轴突通过刺来突触，因此问题已经很明显，在光学显微镜水平上不能以树突和轴突之间接触的形式捕获，但是可以认为，如果在光学下，就不会这样做，即使是不存在的，就不会说明它的范围，即人们认为，即使使用光学显微镜也可以进行一定的估计，并且目前正在使用此方法收集数据。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

玉巻,伸章: "Establishement of two-cell intracellwlar labeling technigue for analysis of association fibers of the CA3-Rippocampal pyramidal neurors" Nevroscience Research Suppl. 16. 159 (1991)

Tamamaki, Nobuaki：“建立用于分析 CA3-Rippocampal 锥体神经元关联纤维的双细胞细胞内标记技术”Nevroscience Research Suppl. 16. 159 (1991)

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0
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玉巻,伸章: "Crossing fiber arrays in the rat Hippocanpus as demonstrated by three-dimensional reconstwefion" J.Comp.Newol. 303. 435-442 (1991)

Tamamaki, Nobuaki：“通过三维重构证明大鼠海马中的交叉纤维阵列”J.Comp.Newol。303. 435-442 (1991)

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通讯作者：
玉巻伸章