神経細胞死に起因する大脳基底核疾患と神経ペプチド

基底神经节疾病和神经细胞死亡引起的神经肽

基本信息

批准号：
03263221
负责人：
八木欽治
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、1)ラット脳内のド-パミン作動性のD1あるいはD2受容体がバゾプレシン分泌を指標とするストレス反応の発現に関与しているかどうか、2)恐怖の情動ストレスを加えたラットの大脳基底核のペプチド画分のうち含量の減少する画分があるかどうか、を調べる実験的研究を行った。D1受容体を置択的に阻害するSCH23390(0.0025‐2.5mg/kg,s.c.)は肉体的ストレス(高頻度、1分間のフットショック)に対するバゾプレシン分泌増強反応を用量依性に阻害したが、高張食塩水注射に対する分泌増強を阻害しなかった。また学習実験によって加えた恐怖の情動ストレスに対するバゾプレシン分泌抑圧反応には無効であった。D2受容体阻害物質であるスルビライドはバゾプレシンの情動ストレス反応を阻害しなかった。間欠的フットショックを30分間加えるやり方で情動ストレスをラットに加え、直後に脳を摘出し、2分間の電磁加熱後大脳基底核を切り出した。組織を塩酸・酢酸中で加熱、ホモゲナイズして上清をとり、これを限害ろ過によって10k以下の成分を採取し、ノルマルヘキサンで脂質を除去した後に凍結乾燥した。得られたペプチド試料をゲルクロマトグラフ(TSK‐G2000WXL)で各画分を逆相HPLC(TSK‐GELODS‐120T)でさらに展開し、215nmで吸光度を測定した。ショック電流がゼロであること以外は同じ操作を加えた対照群の画分と比べて含量の減少した画分が3ピ-ク存在した。これら3画分を合成ペプチドTRH,オキシトシン、バゾプレシン、CCK8、ソマトスタチン、CRF41、SP11のピ-クと比較してみたがいずれも一致しなかった。今後動物数を増して統計的に解析すること、組織量を増してアミノ酸分析を可能にする方向に実験を進める予定である。

今年，1）大鼠脑或D2受体中的D1或D2受体参与用Bazopeshin分泌的压力反应作为指标，2）进行了恐惧的压力。为了减少碱基核的肽。选择D1受体的SCH23390（0.0025-2.5mg/kg，S.C。）抑制了Bazopsin分泌对身体应力的增强反应（高频，1分钟脚冲击），但剂量依赖性抑制了。盐和水注射的分泌增加。在学习实验添加的恐惧的情绪压力的Bazopsin分泌反应中，它也被无效。 D2受体抑制剂Subiride并没有阻碍Bazopeshin的情绪压力反应。除了大鼠外，通过增加间歇性脚冲击30分钟的方法，将情绪压力添加到大鼠中，然后立即去除大脑，并在电磁加热基础基础后进行两分钟。将组织加热并在盐酸和乙酸盐中匀浆以去除上清液，并通过损伤过滤收集10 K或更少的成分，并用正常的己烷去除了脂质，然后冷冻和干燥。将所获得的肽样品进一步扩展在带有凝胶曲线仪（TSK -G2000WXL）的反相HPLC（TSK -Gelods -120T）中，并在215 nm处测量吸光度。除了零冲击电流外，与对比组相比，添加了相同操作的对比组相比，含量减少了3页。我将这三个中风与合成肽TRH，催产素，Bazaopsin，cck8，somato sthitin，crf41，sp11进行了比较，但它们都不匹配。将来，将对动物的数量进行统计分析，并将朝着增加组织量并实现氨基酸分析的方向进行实验。