イネのロイシンジッパ-型DNA結合タンパク質の遺伝子構造と機能

水稻亮氨酸拉链型DNA结合蛋白的基因结构与功能

基本信息

批准号：
03262215
负责人：
草野友延
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Akita Prefectural College of Agriculture
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1993
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03262215/
关键词：
イネロイシンジッパ-DNA結合タンパク質低温

项目摘要

我々は,種々の環境ストレスのうち低温(5℃)がイネ植物に及ぼす影響を遺伝子発現のレベルの違いで検出しようと研究を進めてきた。独自に開発したcDNAライブラリ-作成法及びサブトラクション法〔Nucleic Acids Res.18:1071(1990),Plaut Cell Physiol.32:in press(1991)〕により低温処理で特異的に誘導される3種のイネcDNAクロ-ンの分離に成功してきた。これら3種のクロ-ンは、低温処理との関連が示唆されているアブシジン酸の処理あるいは高浸透圧(0.5Mマニト-ル)処理によっては誘導はおこらず,また熱ショク処理によっても誘導されない。更には1度低温で誘導されたものを常温25℃に戻してやると転写レベルでの誘導が全くおこっていない事も確認している。従ってこれらのクロ-ンは低温処理により特異的に発現が誘導されると結論した。これらのクロ-ンのうちLip19と命名したものは1323塩基対からなり,1次構造解析及びセンス鎖の同定などより約19,000の分子量のタンパク質をコ-ドし,その遺伝子産物はタンパク質デ-タベ-ス検索の結果トウモロコシ由来のジッパ-モチ-フをもつDNA結合タンパク質であることが明らかになっている。ゲノミックサザン法によりlip19遺伝子は1コピ-であることが判明した。λgtloの部分ライブラリ-より,ゲノミッククロ-ンを4kbのEcoRI断片として単離した。物理地図及び1次構造の解析により,lip19は翻訳領域,非翻訳領域を問わず挿入配列をもたないことが明らかとなった。現在,E.ColiのTクポリメラ-ゼ/Tクプロモ-タ-発現系で作らせたLip19を用い,DNA認識配列の同定を行っている。

我们一直在研究基于基因表达水平的差异，以检测低温（5°C）对各种环境应力的水稻植物的影响。 Using the original cDNA library-creation method and subtraction method (Nucleic Acids Res. 18:1071 (1990), Plaut Cell Physiol. 32:in press (1991)], we have successfully isolated three types of rice cDNA clones specifically induced by low temperature treatment. These three types of clones are not induced by treatment with abscisic acid or high osmotic pressure (0.5M manitole), which suggests a relationship with low temperature treatment,并不是由热休克处理。有义务链的结构分析和鉴定，其基因产物被发现是一种DNA结合蛋白，其拉链基序来自玉米。基因组南部方法表明，LIP19基因为1个。从λgtlo的部分文库中分离出基因组克隆作为4KB Ecori片段。对物理图和主要结构的分析表明，LIP19在翻译或未翻译区域中都没有插入的序列。当前，使用大肠杆菌T-Cupolymerase/T-Cupomota表达系统产生的LIP19鉴定了DNA识别序列。