エンドセリン変換酵素の生化学的解析と血圧調節機構の研究

内皮素转换酶生化分析及血压调节机制研究

基本信息

批准号：
03268203
负责人：
木村定雄
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)中性金属性エンドセリン変換酵素の精製と特性解析エンドセリンを産生するブタ肺を材料にして、その膜分画から、エンドセリン変換酵素を精製し、その特性解析を行った。〔結果〕2種(M1,M2)のエンドセリン変換活性をもつ酵素を検出し、いずれも膜結合型中性金属プロテア-ゼであった。M1は糖タンパク質であり、ビッグエンドセリン‐1のみを切断し、内皮由来の変換酵素とほとんど同一特性をもち、一方、M2は腎臓などに多く存在するプロテア-ゼ、neutralendopeptidase 24.11.(NEP)と非常によく似ていた。M1酵素の阻害剤として、ホスホラミドンが有効であり、その有効濃度はμuM濃度であり、NEPのnM濃度とは明かに異なっていた。以上のことから、ホスホラミドンおよびその誘導体は,一種の降圧薬となり得る可能性を示した。2)ホスホラミドンによる培養内皮細胞への効果およびラットin vivo投与の解析in vivo投与したビッグエンドセリン‐1(big ET‐1)がいかに昇圧活性を発現するかを解明するために、本研究では、臓器に蓄積した標識big ET‐1の分子型の解析、また標識big ET‐1を培養内皮細胞および平滑筋細胞と反応させたときの分子型を解析した。〔結果〕(1)静注投与した標識big‐ET‐1のET‐1への変換が実際に起こっており、体内分布で検討した腎臓を除くどの臓器(肺、肝臓、腸間膜、脾臓、心室)においても、主要ピ-クとしてET‐1を検出した。(2)培養血管内皮細胞および平滑筋細胞は培養中(細胞存在下)に、標識big ET‐1をET‐1に変換し、その変換はホスホラミドンの存在により阻害された。〔考察〕big ET‐1がin vivoで昇圧活性を持つのは、変換酵素により生成したET‐1が引き起こすと結論した。

1）使用产生中性金属Meteric内膜转化酶的内在的猪肺和特征性分析末端人类学作为材料，从膜分裂中完善了内素转化酶，并进行了特征分析。 [结果]具有两种类型的酶（M1，M2）具有内透明转化活性，所有酶均为膜型中性金属蛋白。 M1是一种糖蛋白，仅剪切大内素1，具有与内皮衍生的转化酶的特征几乎相同的特征，而M2，而M2是一种蛋白质，在肾脏等中常见，并且（NEP）。作为M1酶的抑制剂，磷光灯有效，其有效浓度为μUM浓度，并且显然与NEP的NM浓度不同。从上面，Hos Horamidon及其衍生物显示出一种降压药的可能性。 2）为了阐明磷光体对内皮细胞的影响以及大鼠在体内给药中大鼠给药的分析，在体内给予大内碱-1（Big ET -1）表达了这项研究中累积的分子分析。分析了BIG ET -1的符号，当符号BIG ET -1与培养的内皮细胞和平滑肌细胞反应时，分子类型进行了分析。 [结果]（1）实际上发生了将提供的符号 - 中级信号转换为ET -1，并且任何器官（肺，肝脏，iLiac膜，脾脏，不包括体内分布中检查的肾脏）。 ET-1被检测为主口袋。（2）在培养物中（在细胞下）中将培养基血管内皮细胞和平滑肌细胞转化为ET -1，并因Hos Horamidon的存在而抑制了转化率。 [考虑] Big ET -1得出的结论是，转化酶产生的ET -1导致体内压力增加。