Homeostatic regulation of metabolic organs by splicing factors and its clinical application

剪接因子对代谢器官的稳态调节及其临床应用

基本信息

批准号：
22H03520
负责人：
宮崎拓郎
金额：
$ 10.73万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

動物実験としてはCWC22コンディショナルノックアウトマウスの表現型解析を行った。本年度は高脂肪食誘発性の肥満症モデルの解析を中心に検討した。解析項目としては各代謝臓器における病理解析、発現解析および死細胞蓄積の評価を検討した。CWC22の欠損により、上述のような肥満症における表現型は増悪化することが明らかとなった。また、骨髄由来マクロファージを単離して、如何なる生理的なプロセスにより上記mRNAスプライシングが制御されるか検討した。RNAseqによりスプライスバリアントの網羅解析も行い、ターゲットとなる遺伝子を複数同定した。同時に、エフェロサイトーシスやファゴサイトーシスの機能解析を行い、ターゲット遺伝子と細胞機能が一致することを確認している。このような機能に直結するターゲット遺伝子のいくつかはタンパク質に翻訳されることが明らかとなっており、当該バリアントを検出する目的で抗体を作成した。また、予備実験で検出されているCWC22ターゲットXについて、リコンビナントタンパク質をマクロファージ細胞ラインに導入し、分子レベルでメカニズムを検討した。Xならびにそのスプライシングバリアントは細胞内分布に差異があり、両者は細胞内で分子間相互作用を呈することが明らかとなった。さらに、病理解析で健常ならびに肥満症症例の脂肪組織におけるCWC22の活性を免疫組織化学的に検出する目的で、病理検体２７例を収集し、目下解析中である。同時に、海外から高BMIの検体も入手した。

动物实验方面，我们对CWC22条件敲除小鼠进行了表型分析。今年，我们重点分析高脂肪饮食诱发的肥胖模型。分析项目包括病理分析、表达分析以及各代谢器官死细胞积累的评估。研究表明，CWC22 缺乏会加剧上述肥胖表型。我们还分离了骨髓来源的巨噬细胞，并研究了控制上述 mRNA 剪接的生理过程。还使用RNAseq对剪接变体进行了全面分析，并鉴定了多个靶基因。同时，我们正在进行胞吞作用和吞噬作用的功能分析，以确认靶基因和细胞功能匹配。很明显，一些与这些功能直接相关的靶基因被翻译成蛋白质，并且产生了抗体来检测这些变异。此外，针对初步实验中检测到的CWC22靶点X，我们将重组蛋白引入巨噬细胞系中，并在分子水平上研究了其机制。研究表明，X及其剪接变体在细胞内具有不同的分布，并且都表现出细胞内的分子间相互作用。此外，还收集了27份病理标本，目前正在进行分析，以免疫组织化学检测健康和肥胖患者脂肪组织中的CWC22活性。同时，还从海外获取了高BMI样本。

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Homepage

DOI：
10.1007/978-3-662-62874-4_42
发表时间：
2021-01-01
期刊：
Start als Hausarzt
影响因子：
0
作者：
Fitzner, G.
通讯作者：
Fitzner, G.

Activated cholesterol metabolism is integral for innate macrophage responses by amplifying Myd88 signaling.

DOI：
10.1172/jci.insight.138539
发表时间：
2022-11-22
期刊：
JCI INSIGHT
影响因子：
8
作者：
Hayakawa, Sumio;Tamura, Atsushi;Nikiforov, Nikita;Koike, Hiroyuki;Kudo, Fujimi;Cheng, Yinglan;Miyazaki, Takuro;Kubekina, Marina;Kirichenko, Tatiana, V;Orekhov, Alexander N.;Yui, Nobuhiko;Manabe, Ichiro;Oishi, Yumiko
通讯作者：
Oishi, Yumiko

心血管代謝疾患に潜む細胞内タンパク質分解系の制御不全

心脏代谢疾病的细胞内蛋白水解系统失调

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Risako Akasu;Takuro Miyazaki;Mohamed Z Elhussiny;Yuki Sugiura;Yuki Tomitsuka;Shogo Haraguchi;Kinya Otsu;Vishwajit S Chowdhury;Akira Miyazaki;宮崎拓郎
通讯作者：
宮崎拓郎

リンパ管機能異常とアテローム性動脈硬化症

淋巴功能障碍和动脉粥样硬化

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
生体の科学
影响因子：
0
作者：
T. Miyazaki; Y. Taketomi; T. Higashi; H. Ohtaki; T. Takaki; K. Ohnishi; M. Hosonuma; N. Kono; R. Akasu; S. Haraguchi; JR. Kim-Kaneyama; K. Otsu; H. Arai; M. Murakami; A. Miyazaki;宮崎拓郎
通讯作者：
宮崎拓郎

King's Collage London(英国)

伦敦国王学院（英国）