Functional roles of epigenetic regulation for understanding multigenic inheritance of CHDs.

表观遗传调控在理解先心病多基因遗传中的功能作用。

• 批准号: 22H03035
• 负责人: 竹内 純
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03035/
• 关键词: 先天性疾患; 非コードRNA; 転写制御; TBX5; 非コード領域; 心臓発生; 先天性心疾患; エピゲノム; 非コードゲノム領域

本研究では、先行研究・萌芽的研究成果から見出された、ヒト先天性心疾患責任遺伝子の一つTBX5遺伝子座において逆方向に転写される２つのlncRNA (Gm5563（心臓特異的）/Gm42017（上肢特異的））に焦点を当てて、マウスモデルとヒトiPS細胞由来分化心筋を用いてヒト先天性疾患重症化のメカニズムの理解を目指す。2022年度に遂行した研究結果を下記に記す。1；Tbx5;Gm5563多重遺伝子破壊マウスの形態解析：CoMBI/EFICを用いた3D空間解析により内部構造の詳細なデータを得ることができた。心室肉柱と房室中隔構造の消失、心房構造の縮小または消失、第一第二咽頭弓の融合または消失、が見受けられた。Tbx5単独のKOでは見受けられないこと、かつ、HOS患者ではレアなケースではあるが前述のような形態異常は報告されていることから、TBX5と遺伝的相互作用する機能性エピゲノム因子であると考えられる。2；Tbx5; Gm42017多重遺伝子破壊マウスの形態解析：iGONAD法を用いて多重遺伝子破壊マウスの作成に成功している。心臓形態異常はTbx5単一遺伝子破壊マウスとほぼ同程度であったのに対して、Tbx5+/-;Gm5563+/-マウス胚心臓ではTbx5+/-マウスと同程度の表現型であったのに対し、上肢においてはTbx5単一遺伝子破壊マウスと同程度の発生異常が見受けられた。このことから二つの非コードRNAによって、Tbx5は特異性を獲得していると考えられる。3；非コードRNAと相互作用する因子の同定:心臓転写因子Tbx5と特異的に相互作用することがわかった。

在这项研究中，两个lncRNA（Gm5563（心脏特异性）/Gm42017（我们旨在利用小鼠模型和人类iPS细胞来源的分化心肌来了解人类先天性疾病恶化的机制，重点是上肢特异性）。 2022 年进行的研究结果如下。 1；Tbx5；Gm5563多基因破坏小鼠的形态学分析：我们能够使用CoMBI/EFIC通过3D空间分析获得内部结构的详细数据。观察到心室小梁和房室间隔结构消失，心房结构缩小或消失，第一、第二咽弓融合或消失。由于仅在 Tbx5 的 KO 中未观察到，并且在 HOS 患者中已报道上述形态异常，尽管这种情况很少见，但它被认为是与 TBX5 存在遗传相互作用的功能性表观基因组因子。完毕。 2；Tbx5；Gm42017 多基因破坏小鼠的形态分析：我们使用iGONAD方法成功创建了多基因破坏小鼠。心脏形态异常与Tbx5单基因缺失小鼠几乎相同，而Tbx5+/-;Gm5563+/-小鼠胚胎心脏与Tbx5+/-小鼠具有相似的表型，在上肢，发育异常与Tbx5单基因缺失小鼠相当。观察基因破坏小鼠。这表明 Tbx5 由于两个非编码 RNA 而获得特异性。 3；与非编码RNA相互作用的因子的鉴定：发现其与心脏转录因子Tbx5特异性相互作用。

项目成果

Interaction between Sall1/4 and Myocd is critical for myocardial compaction through the regulation of cyclin genes

Sall1/4 和 Myocd 之间的相互作用通过调节细胞周期蛋白基因对心肌致密至关重要

• 发表时间: 2022
• 作者: Katano W;Mori S;Tajika Y;Takeuchi JK and Koshiba-Takeuchi K
• 通讯作者: Takeuchi JK and Koshiba-Takeuchi K

Combined method of whole mount and block‐face imaging: Acquisition of <scp>3D</scp> data of gene expression pattern from conventional in situ hybridization

整体贴片和块面成像相结合的方法：从常规原位杂交中获取基因表达模式的<scp>3D</scp>数据

• DOI: 10.1111/dgd.12827
• 发表时间: 2022
• 期刊: Development, Growth &amp; Differentiation
• 作者: Sutrisno Aldy Anindyawan;Katano Wataru;Kawamura Hayata;Tajika Yuki;Koshiba‐Takeuchi Kazuko
• 通讯作者: Koshiba‐Takeuchi Kazuko

UCSF/Gladstone Institute(米国)

加州大学旧金山分校/格莱斯顿研究所（美国）

Sall1/4 are required for cardiac conduction system development by delimiting Hcn4-positive region

通过界定 Hcn4 阳性区域，Sall1/4 是心脏传导系统发育所必需的

• 发表时间: 2022
• 作者: Katano W;Mori S;Tajika Y;Takeuchi JK and Koshiba-Takeuchi K
• 通讯作者: Takeuchi JK and Koshiba-Takeuchi K

Sall1/4はSrf/Myocdと協調して胎児期の心筋増殖を制御する

Sall1/4配合Srf/Myocd控制胎儿心肌增殖

• 发表时间: 2022
• 作者: 片野亘;森俊太;多鹿友喜;竹内純;小柴和子
• 通讯作者: 小柴和子