Functional analysis of novel proteins that accumulate at interorganelle contact sites

在细胞器间接触位点积累的新型蛋白质的功能分析

• 批准号: 22H02568
• 负责人: 田村 康
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02568/
• 关键词: オルガネラ; オルガネラコンタクトサイト; オルガネラコンタクト; 核; 液胞; NVJ; ミトコンドリア; 小胞体

本研究では，我々が独自に開発したオルガネラ間コンタクトサイトに局在するタンパク質を網羅的に同定する方法を用いて新たに見出したオルガネラコンタクトサイト局在タンパク質の機能解明を目的としている。具体的にはヒトER-ミトコンドリア間や，出芽酵母の核膜-液胞間，ミトコンドリア-液胞間コンタクトサイトに局在することが示唆されている新規因子の機能を解明する。特に昨年度は核膜-液胞間コンタクトサイト（NVJ, Nuclear-Vacuole Junction）に局在することが示唆されていたタンパク質の内，4つの因子が新規NVJ因子であることを確認し，Gdn1, 2, 3, 4と命名した。NVJ形成コア因子であるNvj1, Vac8を欠失した細胞ではGdn1はNVJに集積できなくなっていたことから，Gdn1がNVJのコアサブユニットに依存してNVJに集積することがわかった。また興味深いことに，Gdn1, 2, 3, 4はグルコース飢餓依存的にNVJに集積する因子であることがわかった。さらにGdn1に関して研究を進めたところ，Gdn1が欠損した酵母株ではGdn2, 3, 4がNVJ局在に局在できなくなることがわかった。この結果から，Gdn1がGdn2, 3, 4のNVJ局在化に関与する上流因子であることがわかった。さらに研究をすすめることで，グルコース濃度依存的にNVJが拡大するメカニズムの解明に貢献する研究成果が得られると期待される。ヒトミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトに関しては，同定していた多くの候補因子100種類程度を全てクローニング氏，細胞内で過剰発現させ，ミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトの形成に影響する因子を探索した。しかしながら，ミトコンドリア-小胞体間コンタクトサイトの形成に顕著に影響する因子を同定することはできなかった。

在这项研究中，目的是阐明有机体接触位点局部蛋白质的功能，该蛋白质是使用一种全面识别位于我们独立开发的 - 跨加工触点位点的蛋白质的方法。具体而言，新因素的功能表明它在人类ER和线粒体之间，发芽酵母的核膜液体以及线粒体和互操接触位点的核膜均具有主导地位。特别是，确认这四个因素是去年的新因素，该因素被认为位于核溶液互连接触位点（NVJ，Nucle-vacuole Junction），而四个因素是新的NVJ因素。 4，命名。在失去NVJ1和VAC8的细胞中，NVJ形成核心因子的细胞不再可以集成到NVJ中，并且发现由于NVJ核心亚单位，GDN1将在NVJ中累积。有趣的是，发现GDN1、2、3、4是NVJ中葡萄糖饥饿依赖性因子。对GDN1的进一步研究表明，GDN2、3、4不能位于GDN1缺乏的酵母邮票的NVJ位置。从这个结果，它表明GDN1是GDN2、3、4的NVJ定位涉及的上限。此外，希望该研究结果将被授予，以促进NVJ通过葡萄糖浓度扩展的机制，具体取决于葡萄糖浓度。关于基因孔 - 智能接触位点，已经鉴定出的100种候选因子都被克隆，在细胞中过表达，并探索了影响线粒体和内在焦点接触位点的因素。但是，不可能确定对线粒体形成和胚胎形成的重大影响。

项目成果

細胞内オルガネラ量の調節メカニズム

细胞内细胞器含量的调节机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 田村康

Regulation of phospholipid transport between the ER and mitochondria

内质网和线粒体之间磷脂转运的调节

• 发表时间: 2022
• 作者: Nishikawa Hanako;Sawasato Katsuhiro;Mori Shoko;Fujikawa Kohki;Nomura Kaoru;Shimamoto Keiko;Nishiyama Ken-Ichi;Yasushi Tamura
• 通讯作者: Yasushi Tamura

オルガネラ間コンタクトを介した リン脂質輸送機構

通过细胞器间接触的磷脂转运机制

• 发表时间: 2022
• 作者: Nishikawa Hanako;Sawasato Katsuhiro;Mori Shoko;Fujikawa Kohki;Nomura Kaoru;Shimamoto Keiko;Nishiyama Ken-Ichi;Yasushi Tamura;田村康
• 通讯作者: 田村康

オルガネラ間コンタクトサイトに局在するタンパク質の同定

鉴定位于细胞器间接触位点的蛋白质

• 发表时间: 2022
• 作者: 古谷萩;沢里克宏;森祥子;藤川絋樹;島本啓子;西山賢一;田村康
• 通讯作者: 田村康

田村研究室

田村研究所