Characterization of a novel kinetochore protein that are involved in cell growth and differentiation.

一种参与细胞生长和分化的新型动粒蛋白的表征。

基本信息

批准号：
17590980
负责人：
KAWASHIMA Toshiyuki
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17590980/
关键词：
kinetochore CENP cytokinesis GAP sister chromosome microtubules two-hybrid ツーハイブリッド法

项目摘要

Our group previously showed that a GTPase activating protein, MgcRacGAP, plays critical roles both in cellular differentiation and cytokinesis (Kawashima et al.,Blood,2000:Hirose et al.,J.Biol.Chem.,2001:Minoshima et al.,Dev.Cell,2003:Tonozuka et al.,Blood 2004:Kawashima et al.,J.Cell.Biol.,2006). In the present study, we identified a protein that interacts with MgcRacGAP by yeast two-hybrid screening. Because this protein localizes to the centromere throughout the cell cycle, we named it CENP-50 (CENtromere Protein, molecular weight 50 KDa). Recently, CENP-50 was also described as KLIP1/MLF1IP. We identified CENP-50 as a novel kinetochore component. We found that CENP-50 is a constitutive component of the centromere that colocalizes with CENP-A and CENP-H throughout the cell cycle in vertebrate cells. To determine the precise role of CENP-50, we examined its role in centromere function by generating a loss-offunction mutant in the chicken DT40 cell line. The CENP-50 knockout was not l … More ethal ; however, the growth rate of cells with this mutation was slower than that of wild-type cells. We observed that the time for CENP-50-deficient cells to complete mitosis was longer than that for wild-type cells. Centromeric localization of CENP-50 was abolished in both CENP-H- and CENP-I-deficient cells. Co-immunoprecipitation experiments revealed that CENP-50 interacted with the CENP-H/CENP-I complex in chicken DT40 cells. We observed severe mitotic defects in CENP-50-deficient cells with apparent premature sister chromatid separation when the mitotic checkpoint was activated, indicating that CENP-50 is required for recovery from spindle damage. Observed premature sister chromatid separation in CENP-50-deficient cells suggested that CENP-50 is required for maintenance of sister chromatid adhesion (Minoshima et al.,Mol.Cell.Biol.,2005). In addition, we have recently identified the region of CENP-50 required for localization to the centromere, and did functional analysis of this region (manuscript in preparation). Less

我们的小组之前表明，GTPase 激活蛋白 MgcRacGAP 在细胞分化和胞质分裂中发挥着关键作用（Kawashima 等人，Blood，2000：Hirose 等人，J.Biol.Chem.，2001：Minoshima 等人， Dev.Cell，2003：Tonozuka 等人，Blood 2004：Kawashima 等人。 al., J.Cell.Biol.,2006）在本研究中，我们通过酵母双杂交筛选鉴定了一种与 MgcRacGAP 相互作用的蛋白质，因为该蛋白质在整个细胞周期中定位于着丝粒，所以我们将其命名为 CENP-。 50（CENtromere 蛋白，分子量 50 KDa）最近，我们也将 CENP-50 描述为 KLIP1/MLF1IP。 CENP-50 作为一种新型动粒成分我们发现 CENP-50 是着丝粒的组成成分，在脊椎动物细胞的整个细胞周期中与 CENP-A 和 CENP-H 共定位。我们通过在鸡 DT40 细胞系中产生功能丧失突变体来检查其在着丝粒功能中的作用，CENP-50 敲除并非如此。 l … More ethal ；然而，具有这种突变的细胞的生长速度比野生型细胞慢，我们观察到CENP-50缺陷细胞完成有丝分裂的时间比野生型细胞长。 CENP-50 的着丝粒定位在 CENP-H 和 CENP-I 缺陷的细胞中被消除，免疫共沉淀实验表明 CENP-50 与 CENP-H 和 CENP-I 缺陷细胞相互作用。我们在鸡 DT40 细胞中观察到 CENP-50 缺陷细胞中存在严重的有丝分裂缺陷，当有丝分裂检查点激活时，姐妹染色单体明显过早分离，这表明 CENP-50 是纺锤体损伤恢复所必需的。在 CENP-50 缺陷细胞中观察到的姐妹染色单体过早分离表明，CENP-50 是维持姐妹染色单体粘附所必需的（Minoshima）等人，Mol.Cell.Biol.，2005）此外，我们最近还鉴定了CENP-50定位到着丝粒所需的区域，并对该区域进行了功能分析（手稿正在准备中）。

项目成果

期刊论文数量（35）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Infertility with defective spermigenesis in mice lacking AF5q31, the target of chromosomal translocation in human infant leukemia.

缺乏 AF5q31 的小鼠因精子发生缺陷而导致不育，AF5q31 是人类婴儿白血病染色体易位的靶点。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Mol.Cell.Biol. 15
影响因子：
0
作者：
Urano;A;et al.
通讯作者：
et al.

Integrin αIIbβ3 induces the adhesion and activation of mast cells through interaction with fibrinogen

整合素αIIbβ3通过与纤维蛋白原相互作用诱导肥大细胞粘附和活化

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J.Immunol. 176
影响因子：
0
作者：
Baba T;Mimura J;Nakamura N;Harada N;Yamamoto M;Morohashi K;Fujii-Kuriyama Y.;沖俊彦;中島秀明;中島秀明;福地由美;川島敏行;沖俊彦
通讯作者：
沖俊彦

Pen-2 is incorporated into the g-secretase complex through binding to transmembrane domain 4 of presenilin 1.

Pen-2 通过与早老素 1 的跨膜结构域 4 结合而整合到 g-分泌酶复合物中。