アポトーシス誘導機構を介する骨髄異形成症候群発症および白血病化の分子解析

细胞凋亡诱导机制介导的骨髓增生异常综合征发病及白血病转化的分子分析

基本信息

批准号：
10470214
负责人：
加藤規子
金额：
$ 5.89万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

骨髄異形成症候群(MDS)および急性骨髄性白血病(AML、M3以外)において観察されるt(3;5)(q25.1;q34)転座の原因キメラ蛋白NPM-MLF1の機能解析を行うことにより、MDS段階を経て白血病に至る多段階発がん機構の一端を解明することを目的とした。また、この過程において、正常造血機構におけるMLF1シグナル伝達系の存在を明らかにし、その制御異常としての白血病発症機構について、以下の諸点を明らかにした。未分化骨髄細胞株・マウス線維芽細胞株へのNPM-MLF1キメラ蛋白の導入は、比較的緩慢なアポトーシスによる細胞死を誘導するが、この細胞死はBcl-2の共発現により回避され、細胞は増殖傾向を示す(これらの結果はOncogene,1999に報告)。また、このことは、キメラ蛋白は何らかの細胞周期G1制御因子に影響を及ぼすことを示している。この点に着目し解析を行った。その結果、キメラ蛋白質によりCDKインヒビターp27^<Kip1>の蛋白質発現レベルが著明に低下し、すでに単離していたMLF1相互作用蛋白質の一つCop9 signalosome subunit 3(CSN3/SGN3)が、同じ複合体に属するJab1(CSN5)を介してp27を負に制御することを見いだした。CSN3は、キメラ蛋白質と同様にアポトーシス誘導能・p27分解促進能を有するが、これらはMLF1の共発現により抑制される。これらの事実は、MLF1-|CSN3>Jab1>p27と続く一連のMLF1シグナル伝達系の存在を示している(投稿中)。同時に、キメラ蛋白質形成を一例とするその制御機構異常が腫瘍化の標的となる可能性を含んでいる(一部の結果をLeukemia,2000に報告)。以上の研究により得た知見を、マウスモデルを用いた研究の併用により、さらに、発展させていきたい。

对在骨髓增生异常综合征 (MDS) 和急性髓系白血病 (AML，M3 除外) 中观察到的负责 t(3;5)(q25.1;q34) 易位的嵌合蛋白 NPM-MLF1 进行功能分析。本研究的目的是阐明导致 MDS 阶段白血病的部分多步致癌机制。此外，在这个过程中，我们阐明了MLF1信号转导系统在正常造血机制中的存在，并阐明了其调控异常导致白血病发生的机制。将NPM-MLF1嵌合蛋白引入未分化的骨髓细胞系和小鼠成纤维细胞系中，由于细胞凋亡相对缓慢而诱导细胞死亡，但通过共表达Bcl-2可以避免这种细胞死亡，从而导致细胞死亡。传播趋势（这些结果报告于 Oncogene，1999）。这也表明嵌合蛋白影响一些细胞周期G1调控因子。我们主要分析这一点。结果，嵌合蛋白显着降低了CDK抑制剂p27^<Kip1>的蛋白表达水平，并且发现先前分离的MLF1相互作用蛋白之一Cop9信号体亚基3（CSN3/SGN3）在同一复合体中，我们发现 p27 通过属于 Jab1 (CSN5) 的负向调节。与嵌合蛋白一样，CSN3 具有诱导细胞凋亡和促进 p27 降解的能力，但这些会受到 MLF1 共表达的抑制。这些事实表明一系列MLF1信号转导系统的存在，包括MLF1-|CSN3>Jab1>p27（目前已提交）。同时，调节机制的异常，例如嵌合蛋白的形成，有可能成为肿瘤发生的靶标（《Leukemia》，2000 年报道了部分结果）。我们希望通过结合小鼠模型的研究来进一步发展从上述研究中获得的知识。