Functional screening and analysis of lipid-related genes critical for temperature preference

对温度偏好至关重要的脂质相关基因的功能筛选和分析

基本信息

批准号：
17H07337
负责人：
曽我部隆彰
金额：
$ 1.75万
依托单位：
National Institute for Physiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-08-25 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

新しい環境で本研究を開始するにあたって以下の準備を進めた。第一に、モデル生物として利用するショウジョウバエの飼育環境を整えた。遺伝子改変ショウジョウバエを扱う隔離エリアを構築し、飼育に必要な設備（インキュベーター、実体顕微鏡作業台、餌作り用ドラフト）を整えた。餌の品質がハエの健康状態の鍵となるため、組成や製法をテストし、安定した餌が供給できる条件を確立した。次に以前の所属研究室よりショウジョウバエ株を入手し、新しい環境下での維持と継代を確立した。また、感覚神経群のタイプ別標識のために必要な株を他の研究室から入手した。第二に、ショウジョウバエの温度嗜好性を評価する行動解析装置を作成した。以前の所属研究室で使用していた機器の情報をベースに、所属機関の技術課と共同で同等のものを作製した。実際にアルミプレート上でリニアな温度勾配を確立するために条件を検討し、生理的な温度範囲でいくつかの温度設定を決定した。さらに手順に改良を加え、それを反映した内容で論文を作成、投稿し、Journal of Visualized Experiments誌に採択された。第三に、実際にショウジョウバエ幼虫を用いて温度嗜好性を検討した。まず野生型が想定した温度走性を示すのかを評価し、18－28℃の範囲では概ね安定した結果が得られることを確認した上で、DAGリパーゼの変異体を用いて同条件下で評価したところ、野生型とは異なる温度嗜好性を示すことが明らかとなった。この結果を平成30年度に米国で開催されるThe 59th Annual Drosophila Research Conferenceにて報告する予定である。一方で、特に10℃付近の低温を含む温度条件では野生型が想定していた走性を示さず、野生型の遺伝子バックグラウンドのチェックと交配によるヘテロ化で対処するべく対応を進めている。

在新的环境中发起这项研究时，进行了以下准备工作。首先，我们为果蝇准备了一个繁殖环境，该环境将用作模型生物。构建了一个孤立的区域，以处理遗传改良的果蝇，并准备了育种所需的设备（孵化器，立体显微镜工作台和喂食草稿）。由于食物的质量是果蝇健康的关键，因此测试了组成和生产方法以确定稳定喂养的条件。接下来，我们从以前的实验室获得了果蝇菌株，并在新环境中建立了维护和通过。此外，从其他实验室获得了感觉神经群体特异性标记所需的菌株。其次，创建了一个行为分析设备来评估果蝇的温度偏好。根据上一项实验室中使用的设备的信息，我们与附属机构的技术部门合作创建了同等数字。检查了条件以实际在铝板上建立线性温度梯度，并在生理温度范围内确定了几个温度设置。此外，这些程序得到了改进，并用反映它们的内容编写和提交了论文，并被《可视化实验杂志》选中。第三，在实践中，使用果蝇幼虫检查了温度偏好。首先，我们评估了野生型是否表现出预期的温度战术，并确认结果通常在18-28°C的范围内稳定，然后在相同条件下使用DAG脂肪酶突变体进行了评估，并揭示了温度偏好与野生类型的偏好不同。结果将在2018年在美国举行的第59届年度果蝇研究会议上进行报告。另一方面，尤其是在温度条件下，包括在10°C左右的低温下，野生类型并未显示出野生型的策略，我们正在采取措施来处理野生型和野生型和异质性的遗传背景来处理它。