血小板活性化因子(PAF)、エイコサノイド受容体とG蛋白質の脱共役

血小板激活因子 (PAF)、类二十烷酸受体和 G 蛋白的解偶联

• 批准号: 04670379
• 负责人: 本田 善一郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670379/
• 关键词: PAF; G蛋白質; エンドトキシン; スプライシング

PAF(血小板活性化因子)は脂質性の化学伝達物質であり、アレルギーや免疫における重要な細胞間伝達物質として働く。我々はその作用の入口であるPAF受容体をユードするcDNAを単離し、種々の発現系を用いてその生物学的な機能を明らかにした。この研究は本研究課題の目標である、隔床的に有用な受要体、G蛋白質間の脱共役物質の開発にあたっての基礎的な資料となる。又PAF受容体遺伝子のクローニングとその構造解析を行って発現調節機構の解明の糸口を得た。さらに、エンドトキシンがその作用の一部をPAF受容体を介して発揮するという確実な証拠を見出した。これはエンドトキシンショックの病態解明に大きなヒントとなると思われる。以下各論的に成果を述ベる。1.PAF受容体とその情報伝達機構 PAF受容体を捕乳類細胞に安定に発現をさせ、その機能を解析した。PAF受容体は百白咳トキシン感受性、非感受性G蛋白質の両者を介してアデニル酸シクラーゼ、ホスホリパーゼC、Az、に連関することを明らかにした。又細胞増殖に重要であるMAPキナーゼ、上流のMAPキナーゼキナーゼをもPAF受容体がドライブすることを明らかにした。部位特異的変異を導入して脱感作、G蛋白質との共役に必須のドメインを同定しつつある。2.PAF受容体遺伝子の構造 PAF受容体遺伝子は3つのエクソンからなり、一番染色体上にある。アプライシングにより2種のmRNAが作られるが、その発現は刺激物質、臓器持異性により独立に変動する。すなわち2つのプロモーターがある。3.エンドトキシンとPAF受要体 PAF受容体発現、非発現細胞と比較することで、エンドトキシンがPAF受容体を介して細胞内カルシウム上昇を〓起することを証明した。

PAF（血小板激活因子）是一种基于脂质的化学信使，在过敏和免疫中充当重要的细胞间信使。我们分离了编码PAF受体的cDNA，这是其作用的切入点，并使用各种表达系统阐明了其生物学功能。这项研究将作为开发受体和 G 蛋白之间的解偶联物质的基础材料，该物质可用于层间，这是该研究项目的目标。我们还克隆了PAF受体基因并分析了其结构，为阐明其表达调控机制提供了线索。此外，我们发现了令人信服的证据表明内毒素通过 PAF 受体发挥其部分作用。这被认为是阐明内毒素休克病理学的主要线索。下面将详细讨论结果。 1.PAF受体及其信息传递机制我们在哺乳动物细胞中稳定表达PAF受体并分析其功能。研究表明，PAF 受体通过百日咳毒素敏感和不敏感的 G 蛋白与腺苷酸环化酶、磷脂酶 C 和 Az 连接。研究还表明，PAF 受体还驱动 MAP 激酶（一种上游 MAP 激酶），对细胞增殖很重要。我们目前正在通过引入位点特异性突变来识别脱敏和与 G 蛋白偶联所必需的结构域。 2.PAF受体基因的结构 PAF受体基因由三个外显子组成，位于第一染色体上。通过应用产生两种类型的 mRNA，它们的表达根据刺激和器官性别而独立变化。也就是说，有两个发起人。 3.内毒素和PAF受体通过比较表达和不表达PAF受体的细胞，我们证明内毒素通过PAF受体引起细胞内钙的增加。

项目成果

Z-i.Honda and T.Shimizu: "The Natural Immune System: Humoral Factors (Eds.E.Simand M.A,Kern)" Oxford University press, (1993)

Z-i.Honda 和 T.Shimizu：“自然免疫系统：体液因素（Eds.E.Simand M.A，Kern）”牛津大学出版社，（1993）

H.Bito,et al.: "Platelet-activating factor (PAF) receptor,in Rat brain,PAF mobilizes Intracellular Ca^<2+> in nippocampal neurons" Neuron. 9. 285-294 (1992)

H.Bito 等人：“大鼠脑中的血小板激活因子 (PAF) 受体，PAF 在尼波坎神经元中动员细胞内 Ca^2” 神经元。

C.Sakanaka,et al.: "Three types of Gid protein of guinea-pig lung:cDNA cloning and analysis of thein tissue distributrn" Biochim.Biophys.Acta. 1175. 61-66 (1992)

C.Sakanaka,et al.：“豚鼠肺的三种类型的 Gid 蛋白：cDNA 克隆和组织分布分析”Biochim.Biophys.Acta。

M.Nakamura,Z-i,Honda,etal.: "Endotoxin transduces Ca^<2+> signaling via pletelet-activating factor receptor" FEBS Lett.314. 125-129 (1992)

M.Nakamura,Z-i,Honda,etal.：“内毒素通过全细胞激活因子受体转导Ca^2信号”FEBS Lett.314。

T.Shimizu,Z-i Honda,et al.: "Platelet-activating factor veceptor and signal transduction" Biochem.Pharmacol.44. 1001-1008 (1992)

T.Shimizu，Z-i Honda，等人：“血小板激活因子载体和信号转导”Biochem.Pharmacol.44。