内毒素の素性に対するトレランス誘導機構の分子生物学的研究

内毒素耐受诱导机制的分子生物学研究

• 批准号: 04670251
• 负责人: 松浦 基博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670251/
• 关键词: エンドトキシン; エンドトキシンショック; エンドトキシントレランス; 合成リピドA類縁化合物; リポポリサッカライド; 腫瘍壊死因子(TNF)

エンドトキシンはグラム陰性菌の細胞壁成分であり、菌体から遊離すると生体にとって有益な活性も障害的な活性も多彩に発現する。グラム陰性菌感染による敗血症に伴うエンドトキシンショックは代表的な障害的活性である。そのショックの誘発時には、エンドトキシンに対する宿主の感受性が著しく上昇していることが示唆され、感受性を高めた動物実験モデルも開発されている。本研究でも感受性を高めたマウスを用い、エンドトキシンの本体であるリポ多糖(LPS)の投与により致死作用を誘導し、ショックのモデルとした。このモデルで事前に微量のLPSを投与しておくと、通常は致死量のLPSを投与しても、マウスは抵抗性を示し生残する(エンドトキシントレランス)。LPSの活性中心はリピドAと呼ばれる成分で、その構造類縁体も種々化学合成されている。それらリピドA類縁化合物の中に、発熱性(エンドトキシンの障害的活性の代表的指標)は示さないが、LPSに代わってトレランスを誘導できる化合物を数種見い出した。これら化合物を用いトレランス誘導機構の解析を行った。ショックの誘発に関与する主なサイトカインと示唆される腫瘍壊死因子(TNF)に対する抗体を投与すると、このモデルでもLPSの致死作用を抑制できた。そこで、LPSまたはリピドA類縁化合物によるトレランス誘導下で、LPS投与によるマウス血清中TNFの上昇に対する効果を検討し、抑制効果を見い出した。生体内でTNF産生の中心的細胞であるマクロファージ系細胞を用いて、細胞レベルでもLPSやリピドA類縁化合物がTNF産生に抑制をかけ、しかもmRNA発現レベルで既に抑制をかけていることを見い出し、分子レベルでトレランス誘導機構の解析を発展できた。また、組換えTNFを用い、TNFの致死作用に対しても、LPSやリピドA類縁化合物がトレランスを誘導できることを見い出し、トレランス誘導機構研究の新展開として複数段階の抑制の関与を示唆する結果をも得た。

内毒素是革兰氏阴性细菌的细胞壁成分，当从细菌细胞中释放时，它表现出多种对生物体有益和有害的活性。与革兰氏阴性细菌感染引起的败血症相关的内毒素休克是典型的破坏活动。有人提出，当诱发休克时，宿主对内毒素的敏感性显着增加，并且也开发了敏感性增加的动物实验模型。在这项研究中，我们使用了易感性增加的小鼠，并给予脂多糖（LPS）（内毒素的主要形式）来诱导致命效应，并将其用作休克模型。在该模型中，如果预先给予少量的LPS，即使给予致死剂量的LPS，小鼠也会产生抵抗力并存活（内毒素耐受）。 LPS的活性中心是一种称为脂质A的成分，并且也已化学合成了其各种结构类似物。在这些脂质 A 相关化合物中，我们发现了几种不表现出热原性（内毒素有害活性的典型指标）但可以代替 LPS 诱导耐受的化合物。使用这些化合物，我们分析了耐受诱导机制。肿瘤坏死因子（TNF）被认为是诱发休克的主要细胞因子，施用抗肿瘤坏死因子（TNF）抗体也抑制了该模型中脂多糖的致死作用。因此，我们研究了LPS给药对LPS或脂质A类似物耐受诱导下小鼠血清TNF增加的影响，并发现了抑制作用。使用巨噬细胞（体内 TNF 产生的主要细胞），我们发现 LPS 和脂质 A 相关化合物在细胞水平上抑制 TNF 产生，并且它们已经在 mRNA 表达水平上抑制它。从分子水平分析耐受诱导机制。此外，使用重组TNF，我们发现LPS和脂质A相关化合物可以诱导对TNF致死效应的耐受，并且我们的结果表明多步抑制也是耐受诱导机制研究的新进展。知道了。