ワモンゴキブリの体液性レクチンの肢の再生に於ける機能解析と構造決定

美洲大蠊肢体再生中体液凝集素的功能分析及结构测定

• 批准号: 03833009
• 负责人: 久保 健雄
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03833009/
• 关键词: リジェネクチン; 26kDaレクチン; レクチン; 再生; ワモンゴキブリ; 昆虫; 筋細胞; 上皮組織; リジェネクチン; 26kDaレクチン; レクチン; 再生; ワモンゴキブリ; 昆虫; 筋細胞; 上皮組織

研究代表者らはこれまでに、ワモンゴキブリの体液から共通抗原性を示す3種類のC型レクチンを精製し、その内regenectin、26kDa lectinと命名したレクチンが肢の再生芽に一過的に出現することを見いだしている。Regenectinが再生芽の筋細胞の周囲に局在するのに対し、26kDa lectinは上皮組織の外側に局在する。従って、ワモンゴキブリの肢の再生芽形成過程では、これらのレクチンが異なる組織の細胞接着分子として働くことにより、再生芽の空間的な秩序の形成に働くものと推察される。更に、regenectinは正常な発生過程には発現しないことから、再生筋細胞の接着に特異的に働く分子であると考えられる。今年度は、regenectinの肢の筋細胞における局在を、組織切片の染色と蛍光抗体法を組み合わせることにより詳細に解析した結果、このレクチンは筋細胞の基底膜か細胞膜の部分と、筋細胞に接する上皮細胞の内側の表面にも局在することを見いだした。このことから、regenectinは再生芽の筋細胞同士の接着に働くばかりでなく、上皮組織と筋組織という異なる組織の細胞の選別にも関与する可能性を新たに指摘できた。更に、regenectinと26kDa lectinの部分アミノ酸配列を決定した結果、これらのレクチンの一次構造は、既に我々の研究室で同じワモンゴキブリの成虫体液から精製し、cDNAクロ-ニングによって一次構造が明らかとなっているLPS結合蛋白(LPSの糖鎖部分を認識するC型レクチンの一種)の一次構造と高い類似性を示すことを見いだした。従って、これらのレクチンは、実際に一次構造の類似したファミリ-を構成していることが示された。次年度は、これらのレクチンの再生における役割を解析するとともに、cDNAクロ-ニングによるレクチンの構造解析を行い、再生芽におけるレクチンmRNAの発現を解析することを目的として研究を推進する。

研究人员先前已经纯化了三种类型的C型凝集素，它们从美国蟑螂的体液中表现出常见的抗原性，并发现凝集素（称为再生蛋白和26KDA凝集素）在LIMB的再生芽中瞬时出现。再生素位于再生芽的肌细胞周围，而26KDA凝集素位于上皮组织外。因此，据估计，在美洲蟑螂的小腿再生芽形成过程中，这些凝集素充当不同组织的细胞粘附分子，从而起作用，从而在重生芽的空间序列形成中起作用。此外，由于在正常发育过程中未表达再生素，因此被认为是一种专门作用于再生肌细胞粘附的分子。今年，我们通过将组织截面染色与免疫荧光方法结合在一起，分析了肌细胞中肌细胞中再生素的定位，发现该凝集素位于肌细胞的基底或细胞膜部分，以及上皮细胞的内部表面以及与肌细胞接触的内部表面。这使得可以指出，再生蛋白不仅充当再生芽中肌细胞之间的粘附，而且还可能参与从不同组织，上皮组织和肌肉组织中选择细胞。此外，我们确定了再生蛋白和26KDA凝集素的部分氨基酸序列，发现这些凝集素的主要结构与LPS结合蛋白的主要结构高度相似（一种识别LPS型凝集素的主要结构（一种识别LPS的聚糖部分），这些结构已从我们实验室中的同一成人体内净化，其初级结构已被净化。因此，这些凝集素已被证明实际上构成了类似的主要结构家族。明年，我们将分析这些凝集素在再生中的作用，并通过cDNA克隆对凝集素进行结构分析，并促进研究，以分析凝集素mRNA在再生芽中的表达。