視床下部、間脳における神経核パターン形成メカニズムの解明

阐明下丘脑和间脑神经核模式形成的机制

基本信息

批准号：
14658246
负责人：
森田規之
金额：
$ 1.66万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

間脳領域の神経組織構築の分子機構の一端を知るため、視蓋前域や視床で発現が認められるLIM/ホメオドメイン型転写因子lim1遺伝子の発現動態を指標として、小型魚類モデル動物ゼブラフィッシュの突然変異体の表現型スクリーニングを行った。雌性単為発生胚スクリーニングによって、視床、視蓋前域と菱脳でのlim1遺伝子の発現が激減する突然変異体hd706-05を新規に見いだすことができ、系統を維持している。この変異体の詳細な表現型を記述する目的で、前脳に発現する発生分化制御遺伝子群、脳領域マーカー遺伝子群の発現動態を組織化学的、分子形態学的に解析した。ゼブラフィッシュにおいて神経系の領域化次いで神経細胞分化が進行する受精後16.5、24、28時間の発生段階の胚に対してwhole-mount in situ hybridization法を施行し、lim1、fgf8、dlx2、pax6、hlx1、shh等の遺伝子について、二重染色in situ hybridization法も適用して遺伝子発現領域の重複性や相補性をも検討しつつ解析したところ、以下の表現型が明らかとなった。突然変異体hd706-05においては、shh陽性のzona limitans intrathalamica(背側視床と腹側視床の境界領域)が後背側に拡大する。終脳、間脳、後脳で発現が認められるdlx2遺伝子が、受精後16.5時間以降、間脳でのみ発現抑制される。視床下部におけるdlx2シグナル陽性細胞が受精後28時間で消失する。さらに抗アセチル化チュブリン抗体による神経細胞体や軸索の可視化によって、前交連等の前脳腹側の交連線維が正中線を越えて反対側に投射できない異常も見いだした。一連の解析から、間脳に特異的なdlx2遺伝子の発現制御機構が存在すること、dlx2遺伝子に依存するshh、lim1遺伝子の間脳領域での発現制御機構の存在が示唆された。

为了找出双脑区域神经组织构建的分子机制之一，我们使用lim/同源域转录因子lim1 lim1基因的表达动力学对小型模型动物中的突变体进行了表型筛选，该动力学在水教和丘脑的前部表达。雌性par源性胚胎筛选允许新的突变体HD706-05，该突变体大大降低了丘脑，前透明区域和菱形脑病中Lim1基因的表达，从而维持了谱系。为了描述该突变体的详细表型，在前脑中表达的发育分化控制和大脑区域标记基因的表达动力学在组织化学和分子上是形态学分析的。斑马鱼中神经系统的区域化：受精后16.5、24和28小时的胚胎通过整个原位杂交进行了神经元分化的进展，并进行了lim1，fgf8，fgf8，dlx2，dlx2，pax6，pax6，pax6，hlx1，shh shh shh sere and sere sere sperect and serem and serem and shem and shem nerthers and nerthers and nerthers nerthers and nerther，分析，检查了基因表达区域的重叠和互补性。在突变的HD706-05中，SHH阳性Zona Limitans Intrathalamica（背侧和丘脑腹侧的边界区域）在后侧面扩张。在受精后16.5小时后，DLX2基因仅在脑脑，Diencephalon和后脑脑中表达。受精后28小时，下丘脑中的DLX2信号阳性细胞消失。此外，使用抗乙酰化的小管蛋白抗体对神经元细胞体和轴突的可视化揭示了异常，从而阻止了前脑腹侧的连合纤维，例如前孔（例如前；一系列分析表明，有一种控制DLX2基因表达的机制，而SHH和LIM1基因依赖于DLX2基因的Diencephalon区域中的表达控制机制。