流出原油を対象とした固定化生分解樹脂による環境修復

固定化可生物降解树脂对泄漏原油的环境修复

• 批准号: 14658179
• 负责人: 藤田 藤樹夫
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14658179/
• 关键词: Bioremediation; Biodegradation of heavy oil; Enrichment culture

昨年度確立した微生物群K-3は14日で重油中の飽和分を60%,芳香族分を34%分解した。このK-3群をPCR-DGGE解析すると4本のDNAバンドが検出され、9種類のコロニーを単離した。16S rDNA塩基配列と生理・生化学的性状から、5株はPseudomonas aeruginosa,2株はOchrobactrum anthropi,2株はClavibacter xyliと同定した。分離株の重油分解率から、K-3群の重油生分解にはP.aeruginosaが中心的な役割を果たしていることを明らかにした。K-3群は重油中の飽和分を14日で40%分解したが、芳香族分は8%しか分解できなかった。そこで、芳香族分生分解能力の高い微生物群を新たに探索し、14日で50%分解できるNo.22群を確立したPCR-DGGE解析で5本のDNAバンドが出現し、4種類のコロニーを単離した。4株のうち1株だけが芳香族添加培地に生育し7日で芳香族分を23%分解した。この株は16SrDNA塩基配列と生理・生化学的性状からPantoea agglomeransと同定した。しかし、P.agglomeransを芳香族培地に継代培養すると生育と生分解率が低下してきたことから、芳香族分を安定して生分解するためにはP.agglomerans以外にも重要な役割を果たしている株が存在すると考えている。確立した微生物群は3ヶ月間凍結あるいは凍結乾燥状態で安定して保存することができた。保護剤として用いたグリセロールは、復元した菌群の栄養源となり歯の生育と生分解率を70%まで上昇させた。本研究で確立した微生物群は、重油中の飽和、芳香族分を均一に生分解でき、凍結乾燥状態で長期間保存できることから、生分解樹脂に固定化でき流出重油の環境浄化に役立つ実用的な菌群である。

去年建立的微生物组K-3分解了重油中60％的饱和含量和14天内的34％的芳香族含量。该K-3组检测到四个DNA带的PCR-DGGE分析，并分离了九种类型的菌落。基于16S rDNA碱基序列以及生理和生化特性，将五种菌株鉴定为铜绿假单胞菌，将两种菌株鉴定为卵片藻植物，并将两种菌株鉴定为Clavibacter Xyli。分离株的重油分解速率表明，铜绿假单胞菌在K-3组的重油生物降解中起着核心作用。 K-3组在14天内将重油的饱和含量分解了40％，但只有8％的芳族含量可以分解。因此，我们搜索了具有高芳族生物降解能力的微生物组，PCR-DGGE分析建立了一个22号组，可以在14天内降低50％，并出现了五个DNA带，并分离了四种类型的菌落。在这四种菌株中，只有一种在芳香族培养基中生长，并且在7天内将芳香族含量降低了23％。基于其16S rDNA碱基序列以及生理和生化特性，该菌株被鉴定为Pantoea groclomerans。然而，由于芳香族培养基中的白假单胞菌的亚培养会降低生长和生物降解率，因此我们认为，还有其他菌株在稳定的芳族含量生物降解中起着重要作用。建立的微生物基团可以稳定地存储在冷冻或冻干状态下3个月。甘油被用作保护剂，成为恢复细菌组的营养来源，并将牙齿生长和生物降解速率提高到70％。这项研究中建立的微生物组是一组实用的细菌，可以在浓油中均匀地生物降解饱和和芳香含量，并且可以在冻干状态下储存很长一段时间，从而使它们固定在可生物降解的树脂上，这些树脂可用于净化汤匙重油的环境。