新しいCO-stimulatory分子Dectin-2リガンド遺伝子の同定

新型协同刺激分子Dectin-2配体基因的鉴定

• 批准号: 14657205
• 负责人: 荒金 兆典
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kinki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657205/
• 关键词: dectin-2; 中波長紫外線; 接触過敏反応; トレランス; UVB; マウス; Dectin-2; Dectin-2リガンド; T細胞クローン; クローンニング

実験動物(マウス)の剃毛背部に1000 J/m^2中波長紫外線(UVB)照射(あるいは対照光線照射)を4日間連続で行い、照射部位に0.5%ハプテン(dinitrofluorobenzene ; DNFB)を塗布し感作を行った。感作5日後にはマウス個体内で既にsuppresorT細胞(Ts)が形成されていることが知られているので、同マウスよりTリンパ球を分離しビオチン化したリコンビナント可溶性dectin-2(sDec2)を用いFACS(fluorescence activated cell sorter)解析を行った。その結果、sDec2に結合するT細胞はUVB照射されDNFB感作された個体でのみ優位な比率で存在したが、感作を行わない群、感作のみを行った群では低比率のsDec2結合細胞を認めたのみである。このことからdectin-2と結合能を持つT細胞はトレランスが成立した個体で有意な比率で誘導されることが判明した。さらに種々のT細胞表面マーカーを用いビオチン化sDec2と3重染色を行いsDec2結合細胞の表現系を検討した。その結果CD4+CD25+T細胞がsDec2と結合親和性を持つことが明らかになった。CD4+CD25+T細胞は調節型T細胞(immunoregulatory T cells, Treg)と呼ばれ、その免疫調節能(従来のサプレッサー活性と同義)が最近注目を浴びている。とりわけ、Tregの機能低下が種々の自己免疫疾患(1型糖尿病、多発性硬化症、橋本病など)の原因と考えられ、免疫調節の中心的役割を演じると考えられている。今回の研究計画によりdectin-2のリガンドを所有する細胞としてCD4+CD25+Tregが明らかになった。今回の検討ではdectin-2リガンドの遺伝子構造はいまだ明らかではないが、今後この点に関し検討する余地がある。

实验动物（小鼠）剃光背部，连续4天用1000 J/m^2中波长紫外线（UVB）（或对照光照射）照射，并在照射区域涂抹0.5%半抗原（二硝基氟苯；DNFB）进行了敏化。已知致敏后 5 天小鼠体内已形成抑制性 T 细胞 (Ts)，因此我们从同一只小鼠中分离出 T 淋巴细胞，并添加生物素化的重组可溶性 dectin-2 (sDec2)。使用FACS（荧光激活细胞分选仪）进行分析。结果，与sDec2结合的T细胞仅在UVB照射和DNFB致敏的个体中以主要比例存在，但仅承认在非致敏组和致敏组中存在低比例的sDec2结合细胞。这表明，具有结合 dectin-2 能力的 T 细胞在已建立耐受性的个体中以显着的速度被诱导。此外，我们使用各种 T 细胞表面标记物对生物素化 sDec2 进行三重染色，以检查 sDec2 结合细胞的表型系统。结果显示CD4+CD25+T细胞与sDec2具有结合亲和力。 CD4+CD25+T细胞被称为调节性T细胞（免疫调节T细胞，Tregs），其免疫调节能力（与常规抑制活性同义）最近引起了人们的关注。特别是，Treg功能下降被认为是各种自身免疫性疾病（1型糖尿病、多发性硬化症、桥本氏病等）的原因，并被认为在免疫调节中发挥着核心作用。该研究项目揭示了CD4+CD25+Treg是拥有dectin-2配体的细胞。虽然本研究中dectin-2配体的基因结构尚不清楚，但这一点还有进一步研究的空间。

项目成果

Maeda A, Matsushita K, Yamazaki F, Kawada A, Tezuka T, Aragane Y.: "Terfenadine antagonism against interleukin-4-modulated gene expression of T cell cytokines."J Invest Dermatol. 121. 490-495 (2003)

Maeda A、Matsushita K、Yamazaki F、Kawada A、Tezuka T、Aragane Y.：“特非那定对抗白细胞介素 4 调节的 T 细胞因子基因表达的拮抗作用。”J Invest Dermatol。

Aragane Y, Maeda A, Schwarz T, Tezuka T, Ariizumi K, Schwarz T.: "Involvement of dectin-2 in ultraviolet radiation-induced tolerance."J Immunol. 171. 3801-3807 (2003)

Aragane Y、Maeda A、Schwarz T、Tezuka T、Ariizumi K、Schwarz T.：“dectin-2 参与紫外线辐射诱导的耐受性。”J 免疫学杂志。

Schwarz A.Maeda A, Wild MK, Kernebeck K Gross N, Aragane Y, Beissert S, Vestweber D, Schwarz T: "Ultraviolet radiation-induced regulatory T cells not only inhibit the induction but can suppress the effector phase of contact hypersensitivity."J Immunol. 17

Schwarz A.Maeda A、Wild MK、Kernebeck K Gross N、Aragane Y、Beissert S、Vestweber D、Schwarz T：“紫外线辐射诱导的调节性 T 细胞不仅抑制诱导，还可以抑制接触超敏反应的效应期。”