興奮性アミノ酸レセプターを介する細胞内シグナルトランスダクション

通过兴奋性氨基酸受体进行细胞内信号转导

基本信息

批准号：
05671855
负责人：
米田幸雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Setsunan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ラット脳シナプス膜標品を用いて、アゴニストグリシン(Gly)とアンタゴニスト5,7-di-chlorokynurenic acid(DCKA)の結合を測定したところ、ポリアミン類は[^3H]Gly結合を増強するのに対して、[^3H]DCKA結合を阻害することが判明した。さらに、膜標品をSH基修飾薬やホスホリパーゼなどで前処理すると、[^3H]Gly結合には著変は見られないのに対して、[^3H]DCKA結合が著明に阻害されることが明らかとなった。これらの実験的事実は、Glyドメインがアゴニスト選択型とアンタゴニスト選択型の少なくとも2種類のコンフォーメンションを持つ可能性を示唆するものである。一方、マウス脳核抽出液中には、activator pro-tein-1(AP1)をはじめAP2、AP3、cyclic AMP response element binding protein(CREB)、nuclear factor kappaB、octamer binding protein、promotor specific transcription factor、およびglucocorticoid response element binding protein等の転写制御印紙が検出されたが、nuclear factor 1は検出されなかった。マウス脳室内にN-menthy1-D-aspar-tic acid(NMDA)を投与すると、投与後2時間の時点でAP1およびCREBのDNA結合能が著明に上昇した。この上昇に対して、DCKAをはじめ5-methy1-10,11-dihydro-5H-dibenzo[a,d]-cyclohepten-5,10-imineやD,L-(E)-2-amino-4-propyl-5-phosphono-3-pentenoic acid、およびifenprodilなどの各ドメインアンタゴニストはいずれも阻止作用を示した。したがって、NMDA投与に伴うAP1およびCREB結合の上昇が、NMDAレセプター複合体を介する現象であることは明白である。以上の結果より、NMDAレセプター複合体に多様性が観察されること、およびNMDAシグナルが細胞膜から細胞核へ細胞内伝達されることが示唆される。

当我们使用大鼠脑突触膜制剂测量激动剂甘氨酸 (Gly) 和拮抗剂 5,7-二氯犬尿酸 (DCKA) 的结合时，我们发现多胺增强 [^3H]Gly 结合，而多胺增强 [^发现 3 H]Gly 结合抑制 [ 3 H]DCKA 结合。此外，当用SH基修饰药物或磷脂酶预处理膜制剂时，[^3H]Gly结合没有显着变化，但[^3H]DCKA结合明显受到抑制。这些实验事实表明Gly结构域可能具有至少两种构象：激动剂选择型和拮抗剂选择型。另一方面，小鼠脑核提取物含有激活蛋白-1（AP1）、AP2、AP3、环AMP反应元件结合蛋白（CREB）、核因子kappaB、八聚体结合蛋白、启动子特异性转录因子和转移控制检测到糖皮质激素反应元件结合蛋白等标记，但未检测到核因子1。当N-薄荷基1-D-天冬氨酸（NMDA）给小鼠脑室内给药时，给药2小时后AP1和CREB的DNA结合能力显着增加。为了响应这种增加，DCKA，5-甲基1-10,11-二氢-5H-二苯并[a,d]-环庚烯-5,10-亚胺，D,L-(E)-2-氨基-4-结构域拮抗剂如丙基-5-膦酰基-3-戊烯酸和艾芬地尔均表现出阻断作用。因此，很明显，与NMDA施用相关的AP1和CREB结合的增加是由NMDA受体复合物介导的现象。这些结果表明在 NMDA 受体复合物中观察到多样性，并且 NMDA 信号在细胞内从细胞膜传递到细胞核。