エンドトキシンショックの抑制機構に関する分子生物学的研究

内毒素休克抑制机制的分子生物学研究

• 批准号: 05670263
• 负责人: 松浦 基博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670263/
• 关键词: エンドトキシンショック; 細菌内毒素; エンドトキシントレランス; リポ多糖(LPS); 合成リピドA類縁化合物; 腫瘍壊死因子(TNF)

グラム陰性菌による敗血症に際しては、その細胞壁構成成分であるエンドトキシン(LPS)の遊離に伴ってショックの誘発が危惧される。このショックの誘発にはLPS刺激によって活性化されるマクロファージ(Mphi)から放出されるモノカイン類、特に腫瘍壊死因子(TNF)、の関与が大きいことが明らかになって来ている。エンドトキシンショックの動物実験モデル系(マウスを使用)で、前もって少量のLPSを投与されたマウスはLPS刺激に対する応答性を低下させ、その後、ショックの誘発に十分量のLPSで攻撃してもショックを起こして死亡することが少なくなる。LPS自身は毒性が強く少量の前投与にも問題が残るが、LPSの活性中心であるリピドAの構造類縁化合物の中に、毒性は示さないがこの様なショックの抑制効果は発揮できる化合物を数種類見出している。本研究では、Mphiの培養系を用い、細胞レベルでもTNF産生に対する抑制効果を発現できることを示し、その際、細胞レベルでの刺激伝達系にどの様な変化が生じているかについて検討した。TNF産生抑制効果を発揮できる化合物は、mRNAの産生段階で既に抑制を掛けていること、LPSの刺激伝達系に関与している可能性の高いタンパク質リン酸化反応の幾つか(代表的な65kDa及び58kDaタンパク質などのリン酸化)にも抑制を掛けていることを見出した。また、Mphi細胞へのLPSの特異的結合に関しても現在研究が進行中であるが、この結合に関しては抑制を掛けていないことを示唆する結果が出つつある。これらの結果を考え合わせると、リピドA類縁化合物で前処理されたMphiのLPS刺激に対する応答性低下機構としては、LPS結合部位(あるいは受容体)の数の減少によるものではなく、Mphi細胞表面へLPSが結合した後の情報伝達系の初期の段階で抑制が掛るため、その後の情報伝達系タンパク質リン酸化反応を経てmRNAの産生へと刺激伝達が流れて行かない機構が存在している可能性が示唆された。

在革兰氏阴性细菌引起的败血症的情况下，令人担忧的是，休克将是由细胞壁成分的内毒素（LPS）释放引起的。很明显，从LPS刺激激活的巨噬细胞（MPHI），特别是肿瘤坏死因子（TNF）中释放出的Monokines参与了这种冲击的诱导。在内毒素休克（使用小鼠）的动物实验模型系统中，事先接受少量LP的小鼠降低了对LPS刺激的反应性，随后用足够量的LPS攻击以引起休克，并引起休克的可能性较小。尽管LPS本身是有毒的，但小剂量的预先管理仍然是一个问题，但我们发现脂质A的几种类型的结构类似物是LPS的活性中心，这些中心没有显示出毒性，但可以表现出这种抑制作用。在这项研究中，我们使用MPHI培养系统来证明对细胞水平的TNF产生的抑制作用，并检查了细胞水平刺激传播系统中的变化。我们发现，在mRNA生产阶段已经抑制了能够抑制TNF产生的化合物，并且某些蛋白质磷酸化反应可能与LPS的刺激传播系统有关（典型的65 kDa磷酸化和58 kDa蛋白等）。此外，目前正在就LPS与MPHI细胞的特异性结合进行研究，但结果开始表明这种结合并未抑制。一起进行这些结果，建议存在一种机制，可以使MPHI对LPS刺激的反应能力放松，这不是由于LPS结合位点（或受体）的数量减少，而是抑制了LPS在LPS表面与MPHI细胞表面的结合和刺激系统的pHASTRIDE SY IMPRAINTY通过MIR通过MR的传播限制的早期阶段的信号传导系统。

项目成果

M.Matsuura: "Multistep regulation mechanisms for toleranse induction to lipcpclysaccharide Lethality in the tumor-necrosis-factor-d-mediated pathway." European Journal of Biochemistry. 220(in press). (1994)

M.Matsuura：“肿瘤坏死因子 d 介导途径中脂多糖致死性耐受酶诱导的多步调节机制。”