B細胞分化における転写調節因子の役割に関する研究

转录调控因子在B细胞分化中的作用研究

• 批准号: 02454190
• 负责人: 渡邊 武
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02454190/
• 关键词: B細胞特異的転写調節; エンハンサ-; 免疫グロブリン遺伝子; DNA結合蛋白; トランスジェニックマウス; HE2; μBエレメント; B細胞分化; 転写調節

ヒト免疫グロブリンH鎖遺伝子のエンハンサ-について,そのCisーacting elementsと解析し,さらにB細胞分化におけるエンハンサ-の役割について研究した。我々はヒトH鎖遺伝子エンハンサ-内に,二つのB細胞特異的転写に重要な役割を果たしているモチ-フを同定した。一つはヒトH鎖遺伝子JーCイントロエンハンサ-内の5'測に我々が見い出したHE2/μBエレメントであり,もう一つは3'側に新たに同定したE6エレメントである。以前に我々はHE2/μBエレメントに結合するB細胞特異的なDNA総合蛋白の存在を示したが,今回,HE2エレメント単独でエンハンサ-活性を示すこと,そのエンハンサ-活性は,B細胞内でのみ強く発揮されるが,T細胞はじめ他のいかなる非B細胞においてもエンハンサ-活性を示さなかった。この事から,H鎖遺伝子エンハンサ-のB細胞特異的転写活性化機能はHE2/μBエレメントの存在によると考えられた。さらにHE2エレメントをエンハンサ-として用いたSV40T抗原遺伝子のトランスジェニックマウスを作製したところ,H鎖遺伝子エンハンサ-全体を用いた場合と同様にB細胞系腫瘍がトランスジェニックマウス全部に発生した。このことから,HE2/μBエレメントはin vivoにおいてもB細胞特異的転写を誘導するエンハンサ-エレメントである事が示された。HE2/μBエレメントに結合するDNA結合蛋白を現在,サウスウエスタン法および機能的なアッセイ法によってcDNAクロ-ニングを行っている。今後、HE2/μBエレメントおよびその総合蛋白遺伝子について,ジ-ンタ-ゲディング法を用いて,B細胞分化における討割を検討してゆく。

通过其顺式作用元件分析了人免疫球蛋白H链基因的增强子，并进一步研究了增强子在B细胞分化中的作用。我们确定了人类H链基因增强子中的一个基序，该基序在两个B细胞特异性转录中起重要作用。一个是我们在人类H链基因J-C介入式增anc中发现的HE2/μb元素，另一个是3'侧的新鉴定的E6元素。以前，我们显示了与HE2/μb元素结合的B细胞特异性DNA积分蛋白的存在，现在仅HE2元素显示出增强剂活性，仅在B细胞中强烈施加，但在任何其他非B细胞中均不得施加。这表明H链基因增强子的B细胞特异性转录激活功能是由于HE2/μb元素的存在。此外，当制备使用HE2元素作为增强剂的SV40T抗原基因的转基因小鼠时，在所有转基因小鼠中都发生B细胞系肿瘤，类似于使用整个H链基因增强子的情况。这表明HE2/μb元素是增强子元件，即使在体内也可以诱导B细胞特异性转录。目前，与HE2/μb元素结合的DNA结合蛋白目前是由西南和功能测定法克隆的。将来，我们将使用DiantAgging方法研究HE2/μb元素及其在B细胞分化中的全面蛋白质基因的审议。

项目成果

JーY Wang,M.Oketani T.Watanabe: "Positive and negative regulation of Ig gene expression by a novel B cell specific enhancer element." Mol.Cell.Biology. 11. 75-83 (1991)

J-Y Wang、M.Oketani T.Watanabe：“新型 B 细胞特异性增强子元件对 Ig 基因表达的正向和负向调节。Mol.Cell.Biology。”11. 75-83 (1991)

H.Koga,H.Kanda,M.Nakashima,Y.Watanabe,K.Endo and T.Watanabe: "Mouseーhuman Chimeric monoclonal antibody to carcinoembryonic antigen(CEA);In vitro and in vivo activities." Hybridoma. 9. 43-56 (1990)

H.Koga、H.Kanda、M.Nakashima、Y.Watanabe、K.Endo 和 T.Watanabe：“针对癌胚抗原 (CEA) 的小鼠-人嵌合单克隆抗体；体外和体内杂交瘤活性”。 43-56 (1990)

K.Hirata,K.Mori,M.Kawabuchi,T.Watanabe: "Morpholgical analysis of the cellular interaction between thymocytes and a thymic stromal cell line(TELー2)." The Anatomical Record. 230. 524-530 (1991)

K.Hirata、K.Mori、M.Kawabuchi、T.Watanabe：“胸腺细胞和胸腺基质细胞系之间细胞相互作用的形态分析（TEL-2）。解剖记录”。

R.Mori,H.Minagawa,S.Sakuma,S.Mohui and T.Watanabe: "“Immunolgy and Prophylaxis of Human Herpesvirus Infection"Herpes simplex virus type I infection in mice with SCIC." Plenum Press.Ed.by C.Lopez, 191-197 (1990)

R.Mori、H.Minakawa、S.Sakuma、S.Mohui 和 T.Watanabe：“人类疱疹病毒感染的免疫学和预防”SCIC 小鼠中单纯疱疹病毒 I 型感染。” Plenum Press.Ed.by C.洛佩兹，191-197 (1990)

I.Ezaki,H.Kanda,K.Sakai,N.Fukui,M.Singu,M.Nobunaga,T.Watanabe.: "Restricted diversity of the variable region nucleotide sepuences of the heavy and light chains of a human rheumatoid factor" Arthritis and Rheumatism. 34. 345-350 (1991)

I.Ezaki,H.Kanda,K.Sakai,N.Fukui,M.Singu,M.Nobunaga,T.Watanabe.：“人类风湿因子重链和轻链可变区核苷酸序列的限制多样性”