B細胞分化における転写調節因子の役割に関する研究

转录调控因子在B细胞分化中的作用研究

• 批准号: 02454190
• 负责人: 渡邊 武
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02454190/
• 关键词: B細胞特異的転写調節; エンハンサ-; 免疫グロブリン遺伝子; DNA結合蛋白; トランスジェニックマウス; HE2; μBエレメント; B細胞分化; 転写調節

ヒト免疫グロブリンH鎖遺伝子のエンハンサ-について,そのCisーacting elementsと解析し,さらにB細胞分化におけるエンハンサ-の役割について研究した。我々はヒトH鎖遺伝子エンハンサ-内に,二つのB細胞特異的転写に重要な役割を果たしているモチ-フを同定した。一つはヒトH鎖遺伝子JーCイントロエンハンサ-内の5'測に我々が見い出したHE2/μBエレメントであり,もう一つは3'側に新たに同定したE6エレメントである。以前に我々はHE2/μBエレメントに結合するB細胞特異的なDNA総合蛋白の存在を示したが,今回,HE2エレメント単独でエンハンサ-活性を示すこと,そのエンハンサ-活性は,B細胞内でのみ強く発揮されるが,T細胞はじめ他のいかなる非B細胞においてもエンハンサ-活性を示さなかった。この事から,H鎖遺伝子エンハンサ-のB細胞特異的転写活性化機能はHE2/μBエレメントの存在によると考えられた。さらにHE2エレメントをエンハンサ-として用いたSV40T抗原遺伝子のトランスジェニックマウスを作製したところ,H鎖遺伝子エンハンサ-全体を用いた場合と同様にB細胞系腫瘍がトランスジェニックマウス全部に発生した。このことから,HE2/μBエレメントはin vivoにおいてもB細胞特異的転写を誘導するエンハンサ-エレメントである事が示された。HE2/μBエレメントに結合するDNA結合蛋白を現在,サウスウエスタン法および機能的なアッセイ法によってcDNAクロ-ニングを行っている。今後、HE2/μBエレメントおよびその総合蛋白遺伝子について,ジ-ンタ-ゲディング法を用いて,B細胞分化における討割を検討してゆく。

我们分析了人免疫球蛋白H链基因增强子的顺式作用元件，并进一步研究了增强子在B细胞分化中的作用。我们鉴定了人类 H 链基因增强子内的两个基序，它们在 B 细胞特异性转录中发挥重要作用。一个是我们在人H链基因J-C intro增强子的5'区发现的HE2/μB元件，另一个是在3'区新鉴定的E6元件。之前，我们证明了存在与HE2/μB元件结合的B细胞特异性DNA合成蛋白，但这次我们证明HE2元件单独表现出增强子活性，并且这种增强子活性仅发生在B细胞内。然而，它在 T 细胞或任何其他非 B 细胞中没有显示出任何增强子活性。这表明H链基因增强子的B细胞特异性转录激活功能是由于HE2/μB元件的存在。此外，当我们使用 HE2 元件作为增强子创建 SV40T 抗原基因转基因小鼠时，所有转基因小鼠中都出现了 B 细胞肿瘤，这与使用整个 H 链基因增强子时类似。这些结果表明HE2/μB元件是即使在体内也能诱导B细胞特异性转录的增强子元件。我们目前正在使用Southwestern方法和功能测定方法克隆与HE2/μB元件结合的DNA结合蛋白的cDNA。未来我们将利用基因打靶方法研究HE2/μB元件及其综合蛋白基因对B细胞分化的影响。

项目成果

JーY Wang,M.Oketani T.Watanabe: "Positive and negative regulation of Ig gene expression by a novel B cell specific enhancer element." Mol.Cell.Biology. 11. 75-83 (1991)

J-Y Wang、M.Oketani T.Watanabe：“新型 B 细胞特异性增强子元件对 Ig 基因表达的正向和负向调节。Mol.Cell.Biology。”11. 75-83 (1991)

H.Koga,H.Kanda,M.Nakashima,Y.Watanabe,K.Endo and T.Watanabe: "Mouseーhuman Chimeric monoclonal antibody to carcinoembryonic antigen(CEA);In vitro and in vivo activities." Hybridoma. 9. 43-56 (1990)

H.Koga、H.Kanda、M.Nakashima、Y.Watanabe、K.Endo 和 T.Watanabe：“针对癌胚抗原 (CEA) 的小鼠-人嵌合单克隆抗体；体外和体内杂交瘤活性”。 43-56 (1990)

K.Hirata,K.Mori,M.Kawabuchi,T.Watanabe: "Morpholgical analysis of the cellular interaction between thymocytes and a thymic stromal cell line(TELー2)." The Anatomical Record. 230. 524-530 (1991)

K.Hirata、K.Mori、M.Kawabuchi、T.Watanabe：“胸腺细胞和胸腺基质细胞系之间细胞相互作用的形态分析（TEL-2）。解剖记录”。

R.Mori,H.Minagawa,S.Sakuma,S.Mohui and T.Watanabe: "“Immunolgy and Prophylaxis of Human Herpesvirus Infection"Herpes simplex virus type I infection in mice with SCIC." Plenum Press.Ed.by C.Lopez, 191-197 (1990)

R.Mori、H.Minakawa、S.Sakuma、S.Mohui 和 T.Watanabe：“人类疱疹病毒感染的免疫学和预防”SCIC 小鼠中单纯疱疹病毒 I 型感染。” Plenum Press.Ed.by C.洛佩兹，191-197 (1990)

JーY Wang,M.Oketani and T.Watanabe: "Positive and negative regulation of Ig gene expression by a novel B cell specific enhancer element." Molecular and Cellular Biology. 11. 75-83 (1991)

J-Y Wang、M.Oketani 和 T.Watanabe：“新型 B 细胞特异性增强子元件对 Ig 基因表达的正向和负向调节。分子和细胞生物学”11. 75-83 (1991)。