マウス・コンソミック系統群に見出された統合的致死現象の原因遺伝子の解析

分析导致小鼠康体品系中发现的综合致死现象的基因

基本信息

批准号：
19650105
负责人：
大野民生
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

コンソミック系統(A/J-7A^<SM>)の妊娠雌を帝王切開して得た産仔の詳細な観察を行った結果、D7Mit125-D7Mit355の領域がSM/J系統のホモ型となっている個体は一切蘇生しなかったが、その領域がA/J系統とSM/J系統のヘテロ型やA/J系統のホモ型となっている個体はともに約70%の個体が蘇生した。したがって、死亡原因は呼吸障害によると考えられたが、当該領域がSM/J系統のホモ型となっている個体の肺の組織学的な観察では、明確な異常が認められなかったため、呼吸障害は肺の異常以外に呼吸中枢の異常による可能性も推定された。A/J系統とSM/J系統を起源として樹立された23系統のSMXAリコンビナント近交系群のSDP(Strain Distribution Pattern)を構成するマーカー数を増やしてより詳細なSDPを構築し、Chr.7の中央部のSM/J系統由来の領域と相互作用して致死現象を起こすA/J系統由来の遺伝子の存在領域を再検証したが、目的とする領域はなかった。したがって、SM/J系統のChr.7の中央部に存在する遺伝子とA/J系統由来の遺伝子が相互作用して致死に至るのではなく、コンソミック系統作製の過程でSM/J系統のChr.7の中央部に存在する遺伝子に起きた変異が致死現象の原因と考え、D7Mit125-D7Mit355の領域内に存在する遺伝子から欠損マウスが致死となることが知られているIlk遺伝子について塩基配列と遺伝子発現を調べたが全く異常がなかった。次に、機能が不明であるが肺で強発現することが知られているDchs1遺伝子の発現を解析したところ、当該領域がSM/J系統のホモ型となっている個体ではこの遺伝子がほとんど発現していないことが判明し、この遺伝子に起きた何らかの変異がA/J-7A^<SM>系統の致死を起こしていると推定された。

通过对Consomic品系(A/J-7A^<SM>)的怀孕雌性剖腹产获得的后代进行详细观察，我们发现D7Mit125-D7Mit355区域对于SM/J品系是纯合的。，该地区大约有70%的A/J谱系和SM/J谱系杂合子，或者A/J谱系纯合子的个体被复活。因此，死亡原因被认为是呼吸系统疾病，但对该区域SM/J纯合株个体的肺部进行组织学观察，没有发现任何明显的异常，推测这可能是由于呼吸系统异常所致。除了肺部异常外，呼吸中枢也有异常。我们通过增加构成从 A/J 系和 SM/J 系建立的 23 个 SMXA 重组自交系的 SDP（菌株分布模式）的标记数量，构建了更详细的 SDP，并且 Chr.7 我们重新检查了其中的区域存在源自A/J株的基因，其与A/J株中央区域的源自SM/J株的区域相互作用并引起致死现象，但没有发现目标区域。因此，并非存在于 SM/J 菌株 Chr.7 中心的基因与源自 A/J 菌株的基因相互作用导致致死，而是 Chr. 发生在位于 7 中心的基因中。我们认为这种突变是致死现象的原因，并研究了Ilk基因的核苷酸序列和基因表达，已知该基因对于存在于D7Mit125-D7Mit355区域的基因缺失的小鼠来说是致命的，但发现没有任何异常。接下来，我们分析了功能未知但已知在肺部强烈表达的Dchs1基因的表达，发现该基因主要在该区域的纯合SM/J品系个体中表达。 A/J-7A^<SM> 菌株与 A/J-7A^<SM> 菌株的死亡无关。