高機能ナノ粒子によるsiRNA治療法・分子イメージング法の開発

使用高功能纳米颗粒开发 siRNA 疗法和分子成像方法

基本信息

批准号：
18659219
负责人：
眞鍋一郎
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659219/
关键词：
ナノDDS 分子イメージング siRNA 遺伝子治療動脈硬化癌血管新生慢性炎症

项目摘要

本研究計画では、ナノ粒子を高機能化することにより、血管疾患・悪性腫瘍の新規治療法・分子イメージング法へと応用することを目的とする。具体的には、冠動脈インターベンション後の血管傷害部位や不安定プラーク、あるいは癌の血管透過性亢進部位へとsiRNAを特異的に集積させる方法を開発する。また、転写因子に対するsiRNAを用いて、治療法へと応用するための基礎的検討を行う。siRNAをCy5標識することにより、蛍光でナノ粒子の分布を検討できる方法を開発した。高感度CCDカメラを用いたイメージングシステムを用いることにより、生きているマウスの腫瘍、肝臓および炎症部位にナノ粒子が集積する像を得ることができた。蛍光を経時的に観察することにより、ナノ粒子が投与24時間後をピークに集積していること、特に炎症部位へ強く集積することを確認した。共焦点顕微鏡の観察では、血管外へ集積していることが確認された。以上より、ナノ粒子の蛍光標識により、分子イメージングに活用できることが明らかとなった。また、実際の治療薬として開発するために、血管新生を促す増殖因子の発現を制御する転写因子HIF-1に対するsiRNAを作成し、ノックダウン効率のよいsiRNAを同定した。実際にこのsiRNAをナノ粒子に含有できることができた。以上より、我々の開発したナノ粒子は癌や炎症部位に集積することから、癌だけでなく、慢性炎症を病態の基礎とする動脈硬化、特に不安定プラークの診断に応用できる可能性が高いことが示された。

该研究项目旨在提高纳米颗粒的功能，并将其应用于血管疾病和恶性肿瘤的新治疗方法和分子成像方法。具体来说，我们将开发一种方法，在冠状动脉介入治疗后血管损伤或不稳定斑块的部位或癌症中血管通透性增加的部位特异性积累siRNA。此外，我们还将开展将转录因子的siRNA应用于治疗方法的基础研究。我们开发了一种通过用 Cy5 标记 siRNA 来使用荧光检查纳米粒子分布的方法。通过使用带有高灵敏度 CCD 相机的成像系统，他们能够获得活体小鼠肿瘤、肝脏和发炎区域中纳米颗粒积累的图像。通过随时间观察荧光，证实纳米粒子在给药后24小时累积达到峰值，并且它们在炎症区域中累积得特别强烈。使用共聚焦显微镜观察证实其积聚在血管外。由上可知，纳米粒子的荧光标记可用于分子成像。此外，为了将其开发为实际的治疗药物，我们创建了针对HIF-1（一种控制促进血管生成的生长因子表达的转录因子）的siRNA，并鉴定了具有高敲低效率的siRNA。我们实际上能够将这种 siRNA 整合到纳米颗粒中。基于上述，我们开发的纳米粒子在癌症和炎症部位积聚，因此很有可能不仅应用于癌症，而且应用于以慢性炎症为病理基础的动脉硬化的诊断，以及特别是显示了易损斑块。