細胞寿命に関する転写因子レベルでの研究

转录因子水平的细胞寿命研究

基本信息

批准号：
18659108
负责人：
徳久剛史
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659108/
关键词：
老化遺伝子ゲノム癌ストレス

项目摘要

本研究では,マウスの胎児繊維芽細胞(Mouse Embryonal Fibroblast: MEF)の培養系をモデルとして,正常細胞がSenescenceから細胞死に至る過程における分子機構を,Bcl6によるゲノムの安定性や体細胞突然変異の導入抑制機構を含めた分子のレベルで明らかにすることを目的とした。すでにBcl6欠損マウス由来のMEF細胞を用いてSenescenceに入る時期が早くかつ,継代培養8-9代以降では細胞が死滅することを見出した。また,Bcl6欠損MEF細胞におけるIg遺伝子のスイッチ領域やc-Myc遺伝子の体細胞突然変異の頻度が,Senescenceに入る時期に増加することを見出した。すでにRNA修飾酵素Adenosine deaminase acting on RNA1(ADAR1)がBcl6の標的遺伝子の一つであり,Bcl6欠損MEF細胞で発現上昇していることを見出しているので,正常マウスやBcl6欠損マウス由来のMEF細胞の継代培養5代目の細胞にADAR1を遺伝子導入したところ,Ig遺伝子のスイッチ領域やc-Myc遺伝子における体細胞突然変異の頻度が著しく高くなることを見出した。この体細胞突然変異の導入とクロマチンヒストンのアセチル化との関係を解析したところ,Bcl6欠損マウス由来のMEF細胞では継代培養6代以降ですでにクロマチンヒストンのアセチル化が起きていた。また,Bcl6欠損マウス由来のMEF細胞を紫外線(UV)や過酸化水素(H2O2)で処理するとより低いドーズでSenescenceに入り,かつアポトーシスを起こしてくることを見出した。この時にもADAR1の発現誘導とクロマチンヒストンのアセチル化が起きて,体細胞突然変異の導入がみられた。現在,体細胞突然変異の導入と細胞寿命との相関を解析している。

在本研究中，我们以小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）培养系统为模型，研究正常细胞从衰老到细胞死亡过程中涉及的分子机制，以及Bcl6引起的基因组稳定性和体细胞突变。目的是在分子水平上阐明，包括抑制转导的机制。使用源自 Bcl6 缺陷小鼠的 MEF 细胞，我们发现它们提前进入衰老状态，并且细胞在第 8 次或第 9 次传代培养后死亡。我们还发现Bcl6缺陷的MEF细胞中Ig基因开关区和c-Myc基因的体细胞突变频率在衰老期间增加。我们已经发现作用于RNA1的RNA修饰酶腺苷脱氨酶（ADAR1）是Bcl6的靶基因之一，并且当ADAR1被导入到传代培养的第5代细胞中时，其表达在Bcl6缺陷的MEF细胞中增加。我们发现Ig基因开关区和c-Myc基因的体细胞突变频率显着增加。当我们分析这种体细胞突变的引入与染色质组蛋白乙酰化之间的关系时，我们发现在源自Bcl6缺陷小鼠的MEF细胞中，染色质组蛋白乙酰化在第6次传代后就已经发生。我们还发现，当来自 Bcl6 缺陷小鼠的 MEF 细胞接受紫外线 (UV) 或过氧化氢 (H2O2) 处理时，它们在较低剂量下进入衰老并引起细胞凋亡。此时，ADAR1 表达被诱导，染色质组蛋白乙酰化发生，导致体细胞突变的引入。我们目前正在分析体细胞突变的引入与细胞寿命之间的相关性。