可逆性完全不死化心筋細胞株の樹立およびナノオーダー機能評価

可逆永生化心肌细胞系的建立及纳米级功能评价

• 批准号: 15659186
• 负责人: 清水 壽一郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659186/
• 关键词: 心筋組織; 心筋細胞; 再生医療; 細胞不死化; 筋線維; 六角格子構造; 筋節構造; 発達; 心筋細胞培養; 可逆的不死化; 収縮蛋白; 心筋線維六角格子; 心肥大・発達

近年、再生医工学・再生医療として心筋細胞移植および心筋組織移植を探る研究が活発に行われている。心筋細胞移植および心筋組織移植による機能回復を図る上で、自家移植がもっとも望ましいが、自己心筋の増殖は期待できず、骨髄など幹細胞からの心筋誘導、骨格筋筋芽細胞移植による心機能回復が試みられている。しかし臨床応用を考えた場合心筋細胞ソースの大量培養による増幅をはかる必要がある。この目的のため、新しい心筋細胞の増幅法として研究分担者の開発した細胞不死化システムを用い、SV40TAgによる心筋細胞への増殖能の付加に成功した。このシステムではSV40TAgを除去し細胞増殖を止めることが可能であり、臨床応用に際しても非常に有望である。本年度は、昨年度樹立したラット新生児培養心筋を不死化し確立した心筋株について、まず発現分子の特徴を解析した。これまでに確認した心筋型トロポニンの発現に加え、ナトリウム、カリウム、カルシウムなど興奮収縮連関に密接に関連するイオントランスポート蛋白、アクチン、ミオシン、トロポミオシン、タイティンなど筋節構造を形作る蛋白の発現も確認出来た。しかしながら、明らかな筋節構造の発達や、収縮など、発達した心筋としての特性を引き出すため伸展刺激の負荷などを行っているが、過度な伸展刺激などの負荷は、Angiotensinなどの刺激と同様、NF-ATを介した病的な心筋肥大を引き起こすとされている。本研究において不死化したような新生児心筋組織の未発達な筋節構造が、生体の筋節構造に発達するまでのメカニズムは未だ明らかにされていない部分が多く、今後の検討課題である。心筋の再生医療の実現には、十分な収縮能を持つ心筋細胞、心筋組織の確保が重要であり、コラーゲン包埋心筋組織およびIPPAM積層心筋細胞シートを生体内で発達させることを試みる。今後、細胞進展刺激、電気的刺激、成長過程のラット新生児の成長因子環境の整備などをより一層体系的に検討し、筋節構造の発達、収縮能の獲得、周辺の心筋細胞との電気的な接合を持ちうる細胞へ誘導するため、引き続き精力的な研究を進める必要がある。

近年来，研究已积极作为一种再生和振兴的医疗服务，以振兴和振兴。自我移植是通过心肌细胞移植和心肌组织移植来恢复功能的最佳选择，但是无法预期自我心脏的生长，以及从干细胞（例如骨髓）的心肌诱导，例如骨髓，以及由于骨骼肌溢出而导致心脏正理型的恢复。它正在尝试。但是，在考虑临床应用时，有必要通过心肌酱的大规模培养来放大。为此，SV40TAG成功地将其作为一种新的Cardimcles肌肉细胞扩增方法共同开发的细胞不变系统，SV40TAG成功地将心脏细胞的生长添加到心脏细胞中。在该系统中，可以删除SV40TAG并停止细胞生长，这对于临床应用非常有前途。今年，我们首先分析了去年大鼠建立和确定的心肌库存表达分子的特征。除了迄今已确认的心肌细胞肌动蛋白的表达外，还要检查形成基于肌肉的结构的蛋白质的表达，例如离子转运蛋白，肌动蛋白，Miocin，Miocin，tropomioosin和Titin，与钠，钾，钾，钾，钾，和钙。然而，进行延伸的暴露是为了提出独特的肌肉段结构的发育和收缩，例如收缩，并进行延伸刺激的负载，但是诸如过度拉伸刺激之类的负载与刺激（例如血管紧张素）相同。据说它会通过NF-AT引起病理心肌增大。在这项研究中已不朽的新生儿肌肉组织的肌肉结构欠发达的机制尚未在生命体肌肉段结构的发展中得到揭示，并且是未来的研究问题。重要的是要以足够的收缩能力保护心肌肌肉细胞和心肌组织，以实现心肌再生医学，并尝试开发活体中的胶原蛋白填充的肌肉组织和IPPAM层压板的心肌细胞细胞表。将来，我们将进一步考虑细胞的进度刺激，电刺激，生长过程中大鼠的生长因子的发展以及随着肌肉结构的发育，获得收缩和周围的心肌细胞而进行的。进行能量研究以诱导可以具有关节的细胞。

项目成果

Doi Y: "Expontial fitting of postextrasystolic potentiation may underestimate the cardiac Ca^<2+> recirculation fraction : a theoretical analysis"Jpn J Physiol. 53(2). 89-96 (2003)

Doi Y：“期外收缩后增强的指数拟合可能会低估心脏 Ca^2 再循环分数：理论分析”Jpn J Physiol。

Normal Distribution of Ventricular Pressure-Volume Area (PVA) of Arrhythmic Beats under Atrial Fibrillation in Canine Heart.

犬心脏房颤下心律失常搏动的心室压力-容积面积 (PVA) 的正态分布。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Am J Physiol Heart Circ Physiol (印刷中)
• 作者: Yagi N;Yagi N;Mohri S
• 通讯作者: Mohri S