超低密度リポタンパク質(VLDL)の酸化修飾と抗酸化物質による抑制

极低密度脂蛋白 (VLDL) 的氧化修饰和抗氧化剂的抑制

• 批准号: 12780097
• 负责人: 新井 博文
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780097/
• 关键词: 超低密度リポタンパク質; apoE; 抗酸化; アスコルビン酸; α-トコフュロール

超低密度リポタンパク質(VLDL)を構成するアポリポタンパクE (apoE)はapoBとともに細胞表面のLDLレセプターおよびグリコサミノグリカン(GAG)へのリガンドとして働き、VLDLの輸送・代謝に重要な役割を果たすことが知られている。平成12年度の報告で、活性酸素によってapoEが酸化修飾を受けると、GAG結合性が低下することを示した。平成13年度では、血液中の主要な抗酸化物質であるアスコルビン酸(AsA)およびα-トコフェロール(α-Toc)がVLDLのapoEの酸化修飾に対してどのような効果を示すかを調べた。健常人の血漿から超遠心分離法によってVLDLを調製し、AsAおよびα-Tocの存在下で、酸化ストレス(遷移金属イオン:Cu^<2+>、ペルオキシラジカル:AAPH、ペルオキシナイトライト:SIN-1)を負荷した。チオバルビツール酸反応性物質およびコレステロールエステルヒドロペルオキシドを定量することにより脂質過酸化反応をモニターした。apoE酸化修飾物をウエスタンブロッティングによって分析した。AsA(200〜1000μM)はCu^<2+>、AAPH、SIN-1が誘導する脂質過酸化反応とそれに伴うapoEの酸化修飾(apoEスメア状バンドの生成)およびヘパリン結合性の減少を強く抑制した。α-Toc(170μM)はCu^<2+>およびSIN-1が誘導する脂質過酸化反応とそれに伴うapoEの酸化修飾およびヘパリン結合性の減少を抑制した。α-TocはAAPHによるVLDLの脂質過酸化反応を抑制しなかったが、apoEの酸化修飾およびヘパリン結合性の減少については抑制した。Cu^<2+>によるVLDLの酸化反応では反応性の高いアルデヒドであるアクロレインが生成し、アポリポタンパク質を修飾したが、AsAおよびα-Tocはこれを抑制した。AsAおよびα-Tocは、VLDLのapoEの酸化修飾を抑制し、生体酸化ストレスによる脂質代謝異常の誘導を予防する効果を持つことが示唆された。

众所周知，构成超低密度脂蛋白（VLDL）的载脂蛋白E（APOE）在VLDL的运输和代谢中起着重要作用，以及APOB作为细胞表面LDL受体和糖胺聚糖（GAG）。 2000年的一份报告显示，当APOE通过活性氧进行氧化修饰时，插入结合特性会降低。 2001年，我们研究了抗坏血酸（ASA）和α-生育酚（α-TOC）的影响，即血液中的主要抗氧化剂，对VLDL中APOE的氧化修饰。 VLDL是通过超速离心的健康人血浆制备的，并充满了氧化应激（过渡金属离子：Cu^<2+>，过氧自由基：AAPH，过氧硝酸盐：SIN-1）在ASA和α-TOC的情况下。通过定量硫巴比妥酸反应物质和胆固醇酯氢过氧化物来监测脂质过氧化反应。通过蛋白质印迹分析了APOE氧化修饰。 ASA（200-1000μM）强烈抑制由Cu^<2+>，AAPH和SIN-1诱导的脂质过氧化反应，以及APOE的氧化修饰（APOE涂片样带的形成）和肝素结合的还原。 α-TOC（170μM）抑制了Cu^<2+>和SIN-1诱导的脂质过氧化反应以及APOE氧化修饰和肝素结合特性的相关降低。 α-TOC并未通过AAPH抑制VLDL的脂质过氧化，但没有抑制APOE的氧化修饰和肝素结合特性的降低。 VLDL与Cu^<2+>的氧化反应产生了丙烯醛，一种高反应性醛和改性的载脂蛋白，但ASA和α-TOC抑制了这一点。有人提出，ASA和α-TOC抑制了VLDL中APOE的氧化修饰，并防止通过生物氧化应激诱导脂质代谢。