超低密度リポタンパク質(VLDL)の酸化修飾と抗酸化物質による抑制

极低密度脂蛋白 (VLDL) 的氧化修饰和抗氧化剂的抑制

• 批准号: 12780097
• 负责人: 新井 博文
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780097/
• 关键词: 超低密度リポタンパク質; apoE; 抗酸化; アスコルビン酸; α-トコフュロール

超低密度リポタンパク質(VLDL)を構成するアポリポタンパクE (apoE)はapoBとともに細胞表面のLDLレセプターおよびグリコサミノグリカン(GAG)へのリガンドとして働き、VLDLの輸送・代謝に重要な役割を果たすことが知られている。平成12年度の報告で、活性酸素によってapoEが酸化修飾を受けると、GAG結合性が低下することを示した。平成13年度では、血液中の主要な抗酸化物質であるアスコルビン酸(AsA)およびα-トコフェロール(α-Toc)がVLDLのapoEの酸化修飾に対してどのような効果を示すかを調べた。健常人の血漿から超遠心分離法によってVLDLを調製し、AsAおよびα-Tocの存在下で、酸化ストレス(遷移金属イオン:Cu^<2+>、ペルオキシラジカル:AAPH、ペルオキシナイトライト:SIN-1)を負荷した。チオバルビツール酸反応性物質およびコレステロールエステルヒドロペルオキシドを定量することにより脂質過酸化反応をモニターした。apoE酸化修飾物をウエスタンブロッティングによって分析した。AsA(200〜1000μM)はCu^<2+>、AAPH、SIN-1が誘導する脂質過酸化反応とそれに伴うapoEの酸化修飾(apoEスメア状バンドの生成)およびヘパリン結合性の減少を強く抑制した。α-Toc(170μM)はCu^<2+>およびSIN-1が誘導する脂質過酸化反応とそれに伴うapoEの酸化修飾およびヘパリン結合性の減少を抑制した。α-TocはAAPHによるVLDLの脂質過酸化反応を抑制しなかったが、apoEの酸化修飾およびヘパリン結合性の減少については抑制した。Cu^<2+>によるVLDLの酸化反応では反応性の高いアルデヒドであるアクロレインが生成し、アポリポタンパク質を修飾したが、AsAおよびα-Tocはこれを抑制した。AsAおよびα-Tocは、VLDLのapoEの酸化修飾を抑制し、生体酸化ストレスによる脂質代謝異常の誘導を予防する効果を持つことが示唆された。

载脂蛋白E（apoE）构成极低密度脂蛋白（VLDL），与apoB一起作为细胞表面LDL受体和糖胺聚糖（GAG）的配体，在VLDL的转运和代谢中发挥重要作用。众所周知在2000年发表的报告中，我们发现当apoE受到活性氧的氧化修饰时，其GAG结合特性会降低。 2001年，我们研究了血液中主要抗氧化剂抗坏血酸（AsA）和α-生育酚（α-Toc）对VLDL中apoE氧化修饰的影响。通过超速离心从健康个体的血浆中制备VLDL，并在AsA和α-Toc 1 存在下制备氧化应激(过渡金属离子：Cu 2+ 、过氧自由基：AAPH、过氧亚硝酸盐：SIN-)。 ）已加载。通过定量硫代巴比妥酸反应物质和胆固醇酯氢过氧化物来监测脂质过氧化反应。通过蛋白质印迹分析 ApoE 氧化修饰。 AsA (200-1000 μM) 强烈抑制 Cu^2+、AAPH 和 SIN-1 诱导的脂质过氧化反应，以及相关的 apoE 氧化修饰（apoE 涂片样条带的产生）和肝素结合的减少。 做过。 α-Toc(170μM)抑制Cu 2+ 和SIN-1诱导的脂质过氧化反应以及相关的apoE氧化修饰和肝素结合的减少。 α-Toc 不抑制 AAPH 诱导的 VLDL 脂质过氧化，但确实抑制 apoE 的氧化修饰和肝素结合的减少。在Cu 2+ 对VLDL的氧化反应中，产生高反应性醛丙烯醛并修饰载脂蛋白，但AsA和α-Toc抑制这种反应。提示AsA和α-Toc具有抑制VLDL中apoE氧化修饰、防止生物氧化应激诱导的脂质代谢异常的作用。