STAT3,C/EBPεによる好中球分化の分子制御機構の解析

STAT3、C/EBPε对中性粒细胞分化的分子调控机制分析

• 批准号: 12770569
• 负责人: 中島 秀明
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo (2001)Keio University (2000)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770569/
• 关键词: 好中球; 細胞分化; 細胞増殖; アポトーシス; C; EBPε; 細胞周期

前年度に引き続き、C/EBPεとエストロゲンレセプターのリガンド結合ドメインの融合分子(C/EBPε-ER)を用いてC/EBPεによる好中球分化誘導機構をさらに詳細に検討した。昨年我々は、IL-3依存性マウス骨髄細胞株LGにC/EBPε-ERを導入しその活性を4-hydroxy tamoxifen(4-HT)で誘導すると、細胞増殖の抑制と好中球分化が引き起こされることを報告したが、本年度はC/EBPεの様々な変異体を作製しC/EBPε-ERによる分化誘導効果の詳細な分子メカニズムを検討した。C/EBPεのN末を様々な長さで欠損させた6つの欠失変異体および中央部分の転写抑制領域を欠失させた2種類の変異体を作製し、ERと融合させてLG細胞に導入した。4-HTでこれら細胞株を刺激し細胞増殖・アポトーシス・形態学的分化誘導に与える影響を検討したところ、N末を欠損した変異体はすべて細胞増殖抑制能・アポトーシス/分化誘導能を欠いていることが明らかになった。また中央部の転写抑制領域を欠失させた変異体では、野生型同様に細胞増殖抑制・アポトーシス/分化誘導効果が見られたことから、C/EBPεの細胞増殖抑制・分化誘導作用にはN末部分が重要であり転写抑制領域は関与していないことが示唆された。

继去年的基础上，我们使用C/EBPε与雌激素受体配体结合结构域（C/EBPε-ER）的融合分子，对C/EBPε诱导中性粒细胞分化的机制进行了更详细的研究。去年，我们将C/EBPε-ER引入IL-3依赖性小鼠骨髓细胞系LG中，并用4-羟基他莫昔芬（4-HT）诱导其活性，从而抑制细胞增殖并诱导中性粒细胞分化。今年，我们创建了C/EBPε的多种突变体，并研究了C/EBPε-ER分化诱导作用的详细分子机制。我们制作了C/EBPε的N末端以不同长度被删除的6个缺失突变体和中央部分的转录抑制区域被删除的2个突变体，并将它们与ER融合以诱导LG细胞。当我们用4-HT刺激这些细胞系并检查其对细胞增殖、凋亡和形态分化诱导的影响时，我们发现所有缺乏N末端的突变体都缺乏抑制细胞生长和诱导细胞凋亡/分化的能力。显然有。另外，在中央转录抑制区被删除的突变体中，观察到与野生型类似的细胞生长抑制、凋亡/分化诱导作用，这表明末端部分是重要的而转录抑制区并不重要。涉及。