分裂酵母を用いたアクチン細胞骨格の制御機構の解明

使用裂殖酵母阐明肌动蛋白细胞骨架的控制机制

基本信息

批准号：
11780508
负责人：
中野賢太郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

真核生物においてアクチン細胞骨格は、細胞の形態形成、細胞質分裂、及び細胞運動などに重要な働きをしている。本研究では、分子遺伝学的解析に適している分裂酵母をモデル生物として利用し、細胞内におけるアクチン細胞骨格の制御機構について解明することを試みた。今年度の研究成果として、アクチン調節蛋白質Adf1及びFim1の解析、細胞内においてアクチン重合の起点として働くと考えられるI型ミオシンMyo1の解析、さらにアクチン細胞骨格を制御するシグナル伝達経路の分子スイッチである低分子量G蛋白質Rhoの解析があげられる。以下に要点を記す。・Adf1によるアクチン繊維の脱重合は細胞に必須な機構である。この過程に関与すると考えられるtwinfilinとAip1を分裂酵母から単離して解析を行った。両分子ともアクチン細胞骨格の制御に関与していることが示された。しかし、Adf1との関係についてはまだ明らかにできていない。・Fim1はアクチン繊維を束化して3次元的な細胞骨格を構築するのに関与する。今回、新たにFim1はアクチン繊維にAdf1と競合して結合し、それを安定化することを発見した(論文投稿準備中)。・近年、アクチン細胞骨格とそれを制御するシグナル伝達経路の接点の一つとしてI型ミオシンが注目されている。今回、分裂酵母のMyo1を単離し、抗体を作製した。蛍光抗体法により細胞内局在性について調べた結果、Myo1はアクチンと共局在していることが示された(Toya et al.,2001)。・低分子量G蛋白質Rho2について解析を行った。真菌においてはアクチン細胞骨格は細胞壁形成の足場となると思われている。Rho2は蛋白質キナーゼPck2を介して、この過程に働いていることを示した(Teresa et al.,2000)。

天然生物中的肌动蛋白细胞骨骼对于细胞形态，细胞质和细胞运动很重要。在这项研究中，我们试图使用适合分子遗传分析的分裂酵母作为模型生物学对象，并阐明细胞中肌动蛋白细胞骨骼的控制机制。由于今年的研究结果，它是对肌动蛋白调整的蛋白ADF1和FIM1的分析，对I型Miosin myo1的分析，该分析被认为是肌动蛋白聚合的起点，以及信号传输转换转换到控制的起点肌动蛋白细胞骨骼。要点如下所述。 ADF1对肌动蛋白纤维的剂量是细胞的基本机制。被认为参与此过程的双菲林和AIP1与酵母菌分离并进行了分析。结果表明，两个分子都参与肌动蛋白细胞骨架的对照。但是，与ADF1的关系尚不清楚。 FIM1参与捆绑肌动蛋白纤维并建造三维细胞骨架。这次，FIM1新发现是用ADF1与ADF1竞争并稳定它（准备发布论文）。・近年来，作为肌动蛋白细胞骨架的接触之一和控制它的信号传递途径之一，I型Miosin一直引起人们的注意。这次，酵母分裂的肌1被隔离以产生抗体。由于通过荧光抗体方法研究细胞耐力的结果，表明MyO1与肌动蛋白重复（Toya等，2001）。・分析低分子量G蛋白Rho2的分析。在真菌中，肌动蛋白细胞骨骼被认为是细胞壁形成的脚手架。 Rho2表明他正在通过蛋白激酶PCK2进行此过程（Teresa等，2000）。