精巣上体における精子受精能獲得抑制因子の生化学的、分子生物学的解析

附睾精子获能抑制因子的生化和分子生物学分析

• 批准号: 11770946
• 负责人: 野原 理
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770946/
• 关键词: 精子; 受精能獲得; 精巣上体; マストミス; 先体反応; 精子運動性因子

受精の分子機構解明の研究は、近年急速に発展してきた体外受精や不妊症の原因究明だけではなく、世界的な人工増加問題に対する避妊ということに関連しても重要な課題の一つである。精巣上体において分泌されると考えられている精子運動性因子、受精能獲得阻止因子等は精子の受精能発現、および精子の保存に関与していると推測されているが、直接的な証拠はなく、未だ不確定である。我々は、精子運動性因子、受精能獲得阻止因子を生化学的、分子生物学的に解析することが哺乳動物受精機構の部分的な解明につながるものと考え、それらを生化学的、分子生物学的に解析し、さらに他種の因子と比較することにより、この分子および精巣上体の生殖生理学的活性を明らかにすることを本研究の目的とした。その研究には実験動物種として、精子が精巣上体液により劇的な変化を受けるマストミスという小型齧歯類を用いた。精子運動性因子の生化学的、分子生物学的解析はまず、マストミス精子を他種で報告されている様々な精子運動性因子培養し、精子の運動性の変化の観察を行った。他種で報告されている物質を様々な濃度で加えたにも関わらず、いずれの物質でも精子の運動性の保持は不可能であった。つづいてマストミス精巣上体より精巣上体液を回収し、フラクショネイションを行い、実際に精子培養液中に添加したのち精子運動性を保持させる成分の分子量の調査を行った。分子量10,000での分離では>10,000および<10,000のフラクションでもそれだけでは精子運動性の保持は困難であったが、組み合わせることによりはじめて運動性の保持が可能となった。以上の所見より、精子運動性の保持には、多数の因子が関与している可能性が考えられた。さらに熱安定性に対する解析では、その因子は熱に安定しており、他の種で報告されている精子運動性因子とは生化学的性状の異なることが考えられた。以上の所見より精子の運動性、受精能獲得を調節する因子は種特異性の高いことが示唆された。

阐明受精分子机制的研究不仅是近年来迅速发展的体外受精和不孕原因调查的重要课题，而且是应对全球性避孕问题的重要课题。人口增加。认为附睾分泌的精子活力因子、生育抑制因子等被认为参与了精子受精潜能的表达和精子的保存，但没有直接证据表明这一点。 ，而且还不确定。我们相信，对精子活力因素和获能抑制因素进行生化和分子生物学分析将有助于部分阐明哺乳动物的受精机制，我们的目的是利用生化和分子生物学方法分析这些因素，以澄清本研究的目的。通过科学分析并与其他物种的因子进行比较，了解该分子和附睾的生殖生理活性。该研究使用了一种名为 Mastomys 的小型啮齿动物，其精子因附睾液而发生巨大变化。为了对精子活力因素进行生化和分子生物学分析，我们首先用其他物种报道的各种精子活力因素培养乳鼠精子，并观察精子活力的变化。尽管添加了其他物种中报道的各种浓度的物质，但没有一种物质能够维持精子活力。接下来，从乳鼠附睾中采集附睾液，进行分级，并在将其实际添加到精子培养液中后研究维持精子活动力的成分的分子量。当以10,000分子量分离时，单独使用>10,000和<10,000的级分难以维持精子活力，但仅通过组合它们就可以维持精子活力。基于上述发现，认为维持精子活力可能涉及多种因素。此外，热稳定性分析表明该因子在热下稳定，其生化特性被认为与其他物种报道的精子活力因子不同。上述研究结果表明，调节精子活力和生育力获得的因素具有高度的物种特异性。

项目成果

中野 寛: "哺乳類の生殖生化学-マウスからヒトまで-"株式会社 アイピーシー. 527 (1999)

Hiroshi Nakano：“哺乳动物的生殖生物化学 - 从小鼠到人类”IPC Corporation 527 (1999)。

中野實,荒木慶彦,野原理: "哺乳類の生殖生化学-マウスからヒトまで-"アイピーシー. 527 (1999)

Minoru Nakano、Yoshihiko Araki、Nobara：“哺乳动物的生殖生物化学 - 从小鼠到人类”IPC 527 (1999)。