脳神経機能の微細な異常の検出を可能とする高感度ニコチンレセプターアッセイ法の開発

开发高灵敏度尼古丁受体测定方法，能够检测脑神经功能的微小异常

基本信息

批准号：
11770502
负责人：
飯田靖彦
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

これまで、ニコチン性アセチルコリンレセプター(nAChR)のα4β2サブタイプに高い親和性、選択性を有する5-iodo-3-(2-(S)-azetidinyl-methoxy)pyridine(5IA)を合成し、その[^<125>I]ヨウ素標識体を高収率、高純度で得ることに成功した。そこで、[^<125>I]5IAのin vivoでの脳内動態についてマウスを用いて検討したところ、投与一時間後で約5%dose/gと脳に高く取り込まれ、そのなかでも視床に最も高く集積し、この集積は持続した。これに対し小脳ではその取り込みは低く、洗い出しも速やかであった。さらに、ラットを用いてex vivoオートラジオグラフィにより検討を行ったところ、マウスを用いた脳内分布実験と同様の結果が得られた。[^<125>I]5IA投与5分前に、nAChRのリガンドであるcytisineを静脈投与した場合、放射能の集積が減少したことから、in vivoにおいても5IAがnAChRに結合していることが示された。また、[^<125>I]5IA投与1時間後におけるラット脳内の放射能の集積量を、[^3H]cytisineの飽和結合実験より得たラット脳局所のニコチンレセプター密度に対してプロットしたところ、脳局所への集積量とニコチンレセプター密度は高く相関しており、[^<125>I]5IAのin vivoでの放射能の集積は、ニコチンレセプター密度を反映したものであることが示された。これらの結果を基礎に、病態モデル動物として前脳基底核(NBM)傷害ラットを作製し、ex vivoオートラジオグラフィにより[^<125>I]5IAの集積を調べた結果、前脳皮質の傷害側で傷害を与えていない側と比較して有意に減少しており、nAChRのBmax値の変化と一致した。以上より、5IAが脳内nAChRの核医学イメージング剤として有効であることが示された。

到目前为止，尼古丁乙酰胆碱受体（NACHR）的α4β2亚型具有较高的兼容性和选择性5-IODO-3-（2-（S） - 氮杂二氨基甲氧基）吡啶（5iA）。以高收率和高纯度获得。因此，当使用小鼠检查[^<125> i] 5ia的大脑动力学时，它被掺入大脑后，在给药后约5％剂量/g中，其中，它是最高的。整合持续了。另一方面，小脑较低，并迅速洗涤。此外，当使用大鼠使用离体自动无线电图检查时，与使用小鼠的脑分布实验获得了相同的结果。 [^<25> i] 5ia在泌尿氏菌的给药前5分钟，NACHR的配体cytisine，放射性的整合已经降低，因此5IA也与NACHR结合了体内。 [^<125> i]将5ia绘制到从[^3H] cytisine的饱和粘结实验中获得的大鼠受体密度一小时后，大鼠脑中的放射性量。尼古丁受体密度高度相关，在体内5ia中的放射性积累反映在尼古丁受体密度中。基于这些结果，将原发性脑核（NBM）损伤大鼠作为病理模型动物制备，并通过体内自动无线电图检查了5iA的积累，从而导致前脑皮层的损伤。与侧面的未造成的一侧相比，与NACHR的BMAX值的变化一致。从上面，它表明5iA在大脑的NACHR中作为核成像剂有效。