雄性ラットにおける、GnRHニューロンに対するGABA性神経入力の生後変化

雄性大鼠 GnRH 神经元 GABA 能神经输入的出生后变化

基本信息

批准号：
11770036
负责人：
美津島大
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770036/
关键词：
GnRH GABA 性成熟黄体形成ホルモン GABA_A受容体雄性ラット GAD67 内側視索前野 GABAA受容体

项目摘要

雄性ラットにおけるGnRHニューロンとGABAニューロンの生後変化に関する免疫組織学的検討を行った。その結果、GnRHニューロン数の成熟過程における変化は認められなかったが、OVLT外側領域でのGAD67陽性細胞数は16日齢では比較的少なく、25日齢では16日齢の2.7倍、30日齢では4.8倍、10週齢では5.7倍に増加することが判明した。またDBB領域でも同様に16日齢では少なく、25日齢では16日齢の1.8倍、30日齢では2.2倍、10週齢では2.8倍に増加することが確認された。一方、大脳皮質では以上のような明確な発達変化は認められず、16日齢から10週齢群まで定常的にGAD67陽性細胞が観察された。Cingulate CortexにおけるGAD67陽性細胞数を定量したところ有意な変動は認められなかった。GABA_A受容体はα、β、γ、δサブユニットが様々なパターンで組み合わされた5量体により形成されているが、特にαとβサブユニットはリガンド結合に中心的な役割を担っていると考えられている。そこで次に、GABAニューロンのGnRHニューロンに対する神経連絡を証明し、GnRHニューロンに発現するGABA_A受容体の成熟変化をサブユニットレベルで検討するために、まずGABA_A受容体α1サブユニットやβ2/3サブユニットとGnRHの二重免疫染色を行い、これらのサブユニット陽性のGnRHニューロン数の成熟変化について検討を行った。16日齢群では約20%のGnRHニューロンがα1サブユニット陽性、40〜60%のGnRHニューロンがβ2/3サブユニット陽性に過ぎないのに対し、10週齢群では約40%のGnRHニューロンがα1サブユニット陽性、80〜90%のGnRHニューロンがβ2/3サブユニット陽性であった。以上より、成熟に伴うGABA_A受容体を発現するGnRHニューロン数の増加が示唆された。

对雄性大鼠 GnRH 神经元和 GABA 神经元的出生后变化进行了免疫组织学研究。结果，在成熟过程中没有观察到GnRH神经元数量的变化，但OVLT外部区域的GAD67阳性细胞数量在16日龄时相对较少，是25日龄时的2.7倍， 30日龄时增加2.7倍，10周龄时增加4.8倍，10周龄时增加5.7倍。还证实DBB区域在16日龄时同样较低，在25日龄时增加1.8倍，在30日龄时增加2.2倍，在10周龄时增加2.8倍。另一方面，大脑皮层没有观察到明显的发育变化，从16日龄到10周龄定期观察到GAD67阳性细胞。当对扣带皮层中的 GAD67 阳性细胞数量进行定量时，没有观察到显着变化。 GABA_A受体由α、β、γ和δ亚基以各种模式组合的五聚体形成，并且特别认为α和β亚基在配体结合中发挥核心作用。因此，为了证明GABA神经元和GnRH神经元之间的神经通讯，并在亚基水平上检查GnRH神经元表达的GABA_A受体的成熟变化，我们首先对GABA_A受体α1亚基和β2/3亚基进行了双重研究。 GnRH 和 GnRH 免疫染色，以检查这些亚基呈阳性的 GnRH 神经元数量的成熟变化。在16日龄组中，大约20％的GnRH神经元对α1亚基呈阳性，40-60％的GnRH神经元仅对β2/3亚基呈阳性，而在10周龄组中，大约40%的GnRH神经元为α1亚基阳性，80-90%的GnRH神经元为β2/3亚基阳性。这些结果表明表达 GABA_A 受体的 GnRH 神经元数量随着成熟而增加。