黄色ブドウ球菌の血球崩壊毒素遺伝子の水平伝播及び毒素の作用機構の解明

金黄色葡萄球菌溶血毒素基因的水平传播及其毒素作用机制的阐明

• 批准号: 11760050
• 负责人: 金子 淳
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760050/
• 关键词: Staphylococcus aureus; γ-Hemolysin; Leukocidin; Panton-Valentine leukocidin; phage combersion; Staphylococws aureus; Lenkocidin; Panton-Valentine Lenkocidin; phage conversion

1.PVL変換ファージの多様性φSLTと名付けたPVL遺伝子を保有する新規ファージを取得し、PVLのファージ変換を証明した。さらにSLTゲノムの全塩基配列を決定し、すでに明らかにしたφPVL及びφPV83-proのゲノムとの比較を行った。φSLTは10bpの3'突出型cosを有し、62個のORFをコードする、42,941bpからなるゲノムを有していた。φPVLとφSLTでは、PVL及びatt周辺約6.4kbのみが共通の配列であり、それ以外の領域は全く異なっていた。一方、PVLのバリアントであるP83株のlukM-lukF-PVクラスター遺伝子を有するφPV83-proのゲノムは、φ11とφPVLの及び他のファージの配列からなっており、このうちcos及びmorphogenesis領域を含む約55%の部分はφPVLとほぼ完全に一致していた。これら3つのPVL変換ファージ/プロファージ、及びφ11の部分配列の比較した結果、これらのファージのゲノムが、組みかえ、調節と複製、バッケージングと頭部、尾部形成、溶菌の各機能モジュールが、それらの境界に位置するjunction部位で組み変わった、キメラ構造をとっていることが明らかになった。Junction部位の塩基配列は3者間で良く保存されており、これらがファージゲノムの再編成に関与していると推定された。2.LukF成分の機能領域の解析LukFのホスファチジルコリン(PC)との結合に重要な残基としてTrp177及びArg198を同定した。さらに、これら2残基間の残基をアラニンに置換する(アラニンスキャン)を行い、上記2残基以外にいくつかの残基が関与している可能性を示唆した。

1。已获得一个名为PVL转换PVL转换PVL的新的PVL基因，并已证明了PVL噬菌体转化率。此外，确定了SLT基因组的整个盐序列，并与已经显示的φPVL和φPV83-PRO基因组进行了比较。 φSLT具有10bp 3'突出的cos，其基因组由42,941 bp组成，编码62个ORF。在φPVL和φSLT中，通常排列了约6.4kb的PVL和ATT，其他区域完全不同。另一方面，具有LUKM-LUKF-PV群集基因p83股份的φpv83-Pro的基因，该基因是PVL变体的，它由φ11和φPvl和其他噬菌体序列组成，其中cos和phage序列围绕cos和cos和cos和cos和phage序列。形态发生区域几乎与φPvl完全一致。通过比较这三个PVL转换PVL转换噬菌体/涂鸦和φ11部分排列的结果，这些噬菌体基因组被转换，协调，重复，背部，头部，尾巴形成和细菌。连接站点位于这些边界上。连接位点的基本序列在这三个方之间得到了很好的保存，据估计它们参与了Phagi基因组的重组。 2。对LUKF组分TRP177和ARG198的功能区域的分析被确定为与LUKF Hosfatidylcholin（PC）键合的重要残基。此外，两个残基之间的残基被丙氨酸（丙氨酸罐）代替，这表明除了上述两个残基外，有几个残基涉及。

项目成果

AKIKO SHIMATANI: "Construction of a LukS-PV Mutant of a Staphylococcal Panton-Valentine Lenkocidin Component having a high LukS-like Function"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 63(10). 1828-1830 (1999)

AKIKO SHIMATANI：“具有高 LukS 样功能的葡萄球菌 Panton-Valentine Lenkocidin 成分的 LukS-PV 突变体的构建”Biosci。

Sachiko NARITA: "Phage conversion of Panton-Valentine leukocidin (PVL) in Staphylococcus aureus : molecular analysis of a PVL converting phage,φSLT"Gene. (In press). (2001)

Sachiko NARITA：“金黄色葡萄球菌中 Panton-Valentine 杀白细胞素 (PVL) 的噬菌体转化：PVL 转化噬菌体的分子分析，φSLT”基因（2001 年出版）。

金子淳: "黄色ブドウ球菌の2成分性膜孔形成毒素の構成及び細胞崩壊機構."蛋白質核酸酵素. 46(4). 497-505 (2001)

Jun Kaneko：“金黄色葡萄球菌双组分成孔毒素的组成和细胞破坏机制”46(4) (2001)。

金子 淳: "細菌の生き残り戦略-外来DNAを武器にするブドウ球菌(総説)"栄養・食糧化学セレクション. 1. 17-25 (1999)

Jun Kaneko：“细菌生存策略 - 使用外来 DNA 作为武器的葡萄球菌（评论）”营养与食品化学选择。1. 17-25 (1999)。

Dan Zou: "Prophage, φPV83-pro Carrying Panton-Valentine Leukocidin genes, on the Staphylococcus aureus P83 chromosome : comparative analysis of genome structure of φPV83-pro, φPVL, φ11 and other phages."Biosci.Biotechnol.Biochem.. 64(12). 2631-2643 (2000)

邹丹：“金黄色葡萄球菌P83染色体上携带Panton-Valentine Leukocidin基因的Prophage，φPV83-pro：φPV83-pro、φPVL、φ11等噬菌体基因组结构的比较分析。”Biosci.Biotechnol.Biochem.. 64( 12）。2631-2643（2000）。