骨粗鬆症での歯髄組織における象牙質形成能の解析

骨质疏松症牙髓组织牙本质形成能力分析

基本信息

批准号：
09771640
负责人：
横瀬敏志
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Meikai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では骨粗鬆症での歯髄組織における象牙質形成能に関して以下のような研究を行った。(1) エストロゲン欠乏ラットにおける象牙芽細胞における複合糖質合成の解析.(2)培養歯髄細胞における象牙質形成過程の解析ならびにPTHrPの影響について。各々の項目に関する研究結果を以下に述べる。1) エストロゲン欠乏ラットにおける象牙芽細胞における複合糖質合成の解析(材料と方法):10週齢の雌SDラットに対して卵巣を摘出したOVXグループと偽手術を行ったShamグループに分け、手術後5週目に下顎骨を摘出し、脱灰したのちパラフィンに包埋して切片を作製した。これらの切片を用いて、ガラクトースに特異的に結合するPNAレクチンを用いて組織化学的染色を行った。(結果):卵巣を摘出したラット(OVX)の切歯の象牙芽細胞がPNAレクチンに強く染色されたのに対して、コントロール(Sham)のラットの切歯の象牙芽細胞はPNAレクチンにほとんど染色されなかった。(考察):以上の結果はエストロゲン欠乏によって象牙芽細胞のプロテオグリカンの糖鎖合成が変化したことを示唆しており、閉経後骨粗鬆症と象牙質形成能には密接な関係があることが示された。2) 培養歯髄細胞における象牙質形成能の解析ならびにPTHrPの影響について(材料と方法):5週齢のSDラットの下顎切歯を抜歯し、歯髄から酵素処理にて細胞を分離し、一定期間培養した。培養細胞にPTHrPを添加し、一定期間培養後、アルカリフォスファターゼ(ALP)活性、オステオカルシン量、カルシウム量、DMP-1の発現量を検討した。(結果):コントロール群の細胞は培養開始から経時的にALP活性、オステオカルシン量、カルシウム量、DMP-1量が増加し、培養20日では象牙質様の結節が形成された。また、PTHrPによって細胞の増殖は促進された。(考察):本研究の結果から、この培養系は歯髄細胞から象牙が細胞への分化過程を反映していることが強く示唆された。また、PTHrPは歯髄細胞の増殖を強く促進することが分かり、将来の覆髄剤への応用の手がかりになる結果であると考えられた。

在本研究中，我们对骨质疏松症患者牙髓组织形成牙本质的能力进行了以下研究。 (1)雌激素缺乏大鼠成牙本质细胞复合碳水化合物合成分析。(2)培养牙髓细胞牙本质形成过程及PTHrP的影响分析。各项目的研究结果如下所示。 1）雌激素缺乏大鼠成牙本质细胞复合碳水化合物合成分析（材料与方法）：10周龄雌性SD大鼠分为摘除卵巢的OVX组和进行假手术的Sham组五周后，下颌骨被取出、脱钙、石蜡包埋并切片。使用与半乳糖特异性结合的 PNA 凝集素对这些切片进行组织化学染色。 (结果)：卵巢切除大鼠(OVX)的门牙中的成牙本质细胞被PNA凝集素强烈染色，而对照(Sham)大鼠的门牙中的成牙本质细胞几乎没有被PNA凝集素染色。（讨论）：上述结果提示，雌激素缺乏改变了成牙本质细胞中蛋白聚糖的糖链合成，表明绝经后骨质疏松与牙本质形成能力之间存在密切关系。 2）培养牙髓细胞牙本质形成能力及PTHrP影响分析（材料与方法）：拔除5周龄SD大鼠下颌切牙，酶处理从牙髓中分离细胞，将细胞分离培养一定时间。将PTHrP添加到培养的细胞中，培养一定时间后，检测碱性磷酸酶（ALP）活性、骨钙素含量、钙含量和DMP-1表达水平。 (结果)：对照组细胞中的ALP活性、骨钙素含量、钙含量和DMP-1含量从培养开始起随着时间的推移而增加，并且在培养第20天形成牙本质样结节。此外，PTHrP还可促进细胞增殖。（讨论）：这项研究的结果强烈表明该培养系统反映了牙髓细胞分化为象牙细胞的过程。此外，PTHrP还被发现能强烈促进牙髓细胞的增殖，这一结果被认为为其作为未来盖髓剂的应用提供了线索。