破骨細胞の骨吸収サイクルに関する経時的、細胞形態学的研究

破骨细胞骨吸收周期的时程和细胞形态学研究

• 批准号: 09771505
• 负责人: 後藤 哲哉
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771505/
• 关键词: 破骨細胞; 形態変化; 位相差顕微鏡; サブスタンスP; カルシトニン; プロテインキナーゼC

破骨細胞は個々に骨吸収サイクルをもっており、骨吸収サイクルに伴って形態変化を生じることが知られている。しかしながら、どのようなものがその形態変化に影響するのかはよくわかっていない。そこで、新生ラットより分離した破骨細胞をHEPES緩衝培養液を用い、37℃に保たれた保温箱内で位相差顕微鏡下で経時的に形態変化を調べた。また、倍溶液中に神経ペプチドであるサブスタンスPならびに対照としてカルシトニンを加えた場合どのような形態変化を生じるのかを検索した。培養液中に10^<-8>MサブスタンスPもしくは50mU/mlカルシトニンを培養液に添加した結果、カルシトニン添加時には添加5分後で細胞の収縮が生じ平均約15%の面積の減少が見られた。一方、サブスタンスP添加群では添加後約15分で約4%の面積の増加が認められた。破骨細胞にはサブスタンスPレセプターが存在することが知られており、今回のサブスタンスP添加時に見られた細胞の伸展はサブスタンスPレセプターを介して生じたものと考えられる。また、プロテインキナーゼCの抑制剤であるスタウロスポリンをサブスタンスPと同時に加えた場合は細胞の伸展は生じなかった。これらの結果より、サブスタンスPは破骨細胞の表面にあるサブスタンスPレセプターに結合し、プロテインキナーゼCを活性化させることにより細胞の伸展が見られたことが考えられた。従って、サブスタンスPも破骨細胞の骨吸収サイクルに関与していることが示唆された。

众所周知，每种破骨细胞都有自己的骨吸收周期，并且形态变化随着骨吸收周期而发生。然而，目前尚不清楚是什么影响了这种形态变化。因此，在相差显微镜下使用 HEPES 缓冲培养基在保存在 37°C 的隔热盒中检查从新生大鼠中分离的破骨细胞随时间的形态变化。我们还研究了当将神经肽 P 物质和降钙素作为对照添加到溶液中时会发生什么形态变化。由于在培养基中添加了10^-8M物质P或50mU/ml降钙素，添加降钙素时，细胞在添加后5分钟发生收缩，面积平均减少约15%。观察到。另一方面，在物质P添加组中，添加后约15分钟观察到面积增加了约4％。已知破骨细胞中存在P物质受体，并且认为添加P物质时观察到的细胞扩散是通过P物质受体引起的。此外，当与P物质同时添加星形孢菌素（一种蛋白激酶C抑制剂）时，没有发生细胞扩散。这些结果表明P物质与破骨细胞表面的P物质受体结合并激活蛋白激酶C，导致细胞扩散。因此，提示P物质也参与破骨细胞的骨吸收循环。