大腸癌における腫瘍内血管増殖制御因子VEGFの発現,腫瘍内新生血管密度とその臨床的意義に関する研究

结直肠癌瘤内血管生长调节因子VEGF的表达、瘤内新生血管密度及其临床意义研究

• 批准号: 09770975
• 负责人: 長谷川 茂
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770975/
• 关键词: 大腸癌; 第VIII因子関連抗原; ラミニン; VEGF; 第8因子関連抗原

大腸癌原発巣切除例例120例を対象に、第VIII因子関連抗原に対する抗体を用いた免疫組織化学的染色を行い、組織中の微小血管を同定した。大腸癌組織内における微小血管密度(TMVD)および腫瘍浸潤先進部間質組織における微小血管密度(SMVD)を算出した。高密度群(1視野あたり40未満)、低密度群(1視野あたり40以上)として検討した。また抗ラミニン抗体を用いラミニンの発現も同時に検討し、癌細胞の接着性の変化、微小血管増生との関連、これらの予後因子としての意義を検討した。また遠隔成績との関連をCoxの比例ハザードモデルを用いた生存分析を行い、従来の臨床病理学的因子とともに遠隔成績に影響する因子の重みを比較した。TMVDは高密度と低密度群の間で遠隔成績に有意差を認めなかったが、SMVDはラミニン発現減弱症例に限り高密度群が低密度群に比較し有意に予後不良であった(p<0.05)。大腸癌組織におけるラミニンの発現滅弱症例のハザード比(HR)は2.11(95%CI:1.08-4.12)でリンパ節転移のHR 3.23(95% CI:1.70-6.17)に比較し低かったが有意な予後因子であった(P<0.05)。ラミニンの発現滅弱かつ周辺の間質組織のMVD高密度群でのHRは2.86(95%CI:1.25-6.55)とさらに予後不良であった(p<0.05)。これらの結果より、ラミニンの発現および周辺間質組織のMVDは他の臨床病埋学的因子とは独立した大腸癌の予後因子でありラミニンの発現とともにSMVDが大腸癌の重要な予後因子であると考えられた。以上の結果をもとに本年度はヌードマウス可移植性胃癌株SC-1-NUを用いて血管新生抑制因子TNP-470を投与すべく実験モデルの基礎的実験を行った。ヒト癌腫瘍は、胃癌株のSC-1-NU(組織型:低分化腺癌)であり、腫瘍移植2〜3週後、推定腫瘍重量が100-300mgに達した時点でヌードマウスをA群)対照群:生理食塩水(0.2ml/body)5日/週、B群)5-FU(20mg/kg)5日/週、C群)TNP-470 30mg/kg 1日おき5回投与の計3群に分け、これらの投与スケジュールを1クールとし、薬剤を腹腔内投与した。SC-1-NUは4クール(各群5匹)をそれぞれ施行した。治療効果は対照群のRW(RW_c)に対するの治療群のRW(RW_t)の比であるT/C比(%)により評価した。化学療法終了後ヌードマウスを犠死させ腫瘍を摘出しホルマリン固定後、CD-34(抗マウスCD-34抗体、藤沢薬品)に対する抗体を用いた免疫組織学的染色を行った。HE染色標本を作成した。CD-34染色により認識された腫瘍内の微小血管密度の結果は現在解析中である。

对120例切除的结直肠癌原发灶进行免疫组织化学染色，使用抗因子VIII相关抗原的抗体对组织中的微血管进行鉴定。计算肿瘤侵袭晚期结直肠癌组织中的微血管密度（TMVD）和间质组织中的微血管密度（SMVD）。研究了高密度组（每个视野少于 40 个）和低密度组（每个视野超过 40 个）。我们还使用抗层粘连蛋白抗体检查了层粘连蛋白的表达，并研究了癌细胞粘附的变化、它们与微血管增殖的关系以及它们作为预后因素的重要性。我们还使用 Cox 比例风险模型进行生存分析，以检查与远期结果的关联，并将影响远期结果的因素与传统临床病理因素的权重进行比较。对于TMVD，高密度组和低密度组之间的长期结果没有显着差异，但对于SMVD，与低密度组相比，高密度组的预后明显较差层粘连蛋白表达（p<0.05）。结直肠癌组织中层粘连蛋白低表达病例的风险比（HR）为2.11（95% CI：1.08-4.12），低于淋巴结转移的HR 3.23（95% CI：1.70-6.17）。但仍是一个重要的预后因素（P<0.05）。在层粘连蛋白表达低、周围间质组织MVD密度高的组中，HR为2.86（95% CI：1.25-6.55），预后更差（p<0.05）。这些结果表明，周围基质组织中的层粘连蛋白表达和MVD是独立于其他临床和病理因素的结直肠癌的预后因素，并且SMVD与层粘连蛋白表达一起被认为是结直肠癌的重要预后因素。基于上述结果，今年我们利用裸鼠可移植性胃癌细胞系SC-1-NU，对给予血管生成抑制剂TNP-470的实验模型进行了基础实验。人癌肿瘤为胃癌株SC-1-NU(组织学类型：低分化腺癌)，肿瘤植入后2～3周，估计肿瘤重量达到100～300mg时将裸鼠分入A组。 ）对照组：生理盐水（0.2ml/体）5天/周，B组）5-FU（20mg/kg）5天/周，C组）TNP-470 30mg/kg腹腔给药，分三组，每组隔日给药5次，给药方案为1个疗程。 SC-1-NU 分 4 个疗程施用（每组 5 只动物）。通过T/C比值（%）评价治疗效果，即治疗组RW（RW_t）与对照组RW（RW_c）的比值。化疗完成后，处死裸鼠，切除肿瘤并用福尔马林固定，然后使用抗CD-34抗体(抗小鼠CD-34抗体，藤泽制药)进行免疫组织学染色。制备HE染色标本。目前正在分析通过 CD-34 染色识别的瘤内微血管密度的结果。

项目成果

桜井洋一: "大腸癌組織および周辺間質における新生血管分布形式と密度-P53,TGFβ1蛋白発現との関連" 消化器癌の発生と進展. 9. 435-439 (1997)

Yoichi Sakurai：“结直肠癌组织和周围基质中的新生血管分布类型和密度-与P53和TGFβ1蛋白表达的关系”胃肠癌的发生和进展（1997）。