トロンボポエチン受容体機能ドメインの解析とその下流シグナル分子の同定

血小板生成素受体功能域分析及其下游信号分子鉴定

基本信息

批准号：
09770828
负责人：
高徳正昭
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

トロンボポエチンとエリスロポエチンのシグナル伝達クロストーク造血因子トロンボポエチン(TPO)が赤芽球分化を誘導することを示唆する所見が、これまでに数施設から報告されているが、その詳細な分子機構は明らかにされていなかった。我々は、TPOで巨核球分化が誘導できるヒト白血病細胞株UT-7/EPO-Mplおよびそのdeletion mutantシリーズ細胞株(Takatoku,et.al.,J.Biol.Chem.1997)を作成し、TPOシグナルがどのようなシグナル機構で赤芽球分化を誘導できるか検討を行った。その結果、TPOはその受容体(c-Mpl)を介して赤芽球分化を誘導することが明らかになった。次にc-Mplの詳細な細胞内シグナル伝達機構をc-Mpl deletion mutantを用いて解析したところ、c-Mpl細胞内領域のBox2部位が赤芽球分化に必須であることが分かった。そしてBox2部位を介しTPO依存性にJak2が活性化され、エリスロポエチン受容体(EPOR)に活性化Jak2が会合し、TPOによる赤芽球分化を誘導していることを明らかにした。さらに、TPOによる赤芽球分化にはc-Mpl以外にEPORの発現が必要なのかどうかを、マウス白血病細胞株Ba/F3を用いて検討した。その結果Ba/F3にc-MplおよびEPORの両者が発現したときに、TPOによる赤芽球分化が強く誘導され、TPO依存性の赤芽球分化にはEPORの発現が重要であることを明らかにした(Takatoku,et.al.submit)。

血小板生成素和促红细胞生成素之间的信号转导串扰一些机构报道的研究结果表明，造血因子血小板生成素（TPO）可诱导成红细胞分化，但详细的分子机制尚未阐明。我们创建了人白血病细胞系 UT-7/EPO-Mpl 及其缺失突变系列细胞系（Takatoku 等，J. Biol. Chem. 1997），它们可以用 TPO 诱导巨核细胞分化。信号诱导成红细胞分化的机制。结果表明，TPO 通过其受体 (c-Mpl) 诱导红细胞分化。接下来，我们利用c-Mpl缺失突变体分析了c-Mpl详细的细胞内信号转导机制，发现c-Mpl细胞内区域的Box2位点对于红系分化至关重要。我们还发现，Jak2 通过 Box2 位点以 TPO 依赖性方式被激活，并且激活的 Jak2 与促红细胞生成素受体 (EPOR) 结合，诱导 TPO 诱导的成红细胞分化。此外，我们使用小鼠白血病细胞系 Ba/F3 研究了 TPO 诱导的红系分化是否需要除 c-Mpl 之外的 EPOR 表达。结果，当c-Mpl和EPOR两者在Ba/F3中表达时，TPO诱导的红系分化被强烈诱导，证明EPOR表达对于TPO依赖性红系分化很重要(Takatoku等人提交)。