微小管細胞骨格による電位依存性カルシウムチャネルの制御機構

微管细胞骨架对电压门控钙通道的调节

基本信息

批准号：
09760266
负责人：
海野年弘
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

モルモット回腸平滑筋の電位依存性カルシウムチャネル電流は、ムスカリン受容体刺激により一過性とその後に持続性に抑制される。我々はこれまでの研究から、一過性と持続性の抑制効果発現に微小管細胞骨格が関与することを見いだした。しかし、受容体の刺激から抑制効果の発現に至る過程において、微小管の重合、脱重合がどのように関わっているのかは明らかになっていない。本研究ではこの点を明らかにする目的で、微小管細胞骨格の重合・脱重合を制御することが知られている情報伝達因子のうちどの因子がムスカリン受容体と連関しているかを検討した。1、フォスフォリパーゼCおよびD阻害薬のウオルトマンニンとD609は、一過性と持続性抑制の発現を阻害した。2、非選択的蛋白キナーゼ阻害薬のスタウロスポリンとチロシンキナーゼ阻害薬のゲニステインは一過性と持続性抑制の発現に影響を与えなかった。3、一過性抑制はイノシトール3リン酸による細胞内ストアからのCa^<2+>放出に起因する。微小管を破壊するコルヒチンは、ストアからのCa^<2+>放出には影響を及ぼさずに一過性抑制の発現を阻害した。4、持続性抑制の発現もコルヒチンの処置により抑制された。微小管を重合させるタクソ-ルはCaチャネル電流を抑制した。タクソ-ルは、ムスカリン受容体刺激で生じる持続性抑制の場合と同様に、Caチャネル電流の不活性化過程を促進して不活性化曲線を過分極側に移動させた。これらの結果から、一過性と持続性の抑制効果発現にフォスフォリパーゼの活性化が関与すること、一過性抑制の発現経路の内、ストアから放出されたCa^<2+>によるCaチャネルの抑制機構に微小管が関与すること、持続性抑制は微小管の重合により発現することが考えられる。以上の成績は、第124回日本獣医学会および第71回日本薬理学会年会で発表し、投稿中論文2編としてまとめた。

豚鼠回肠平滑肌中的电压门控钙通道电流被毒蕈碱受体刺激暂时抑制，然后持续抑制。从我们之前的研究中，我们发现微管细胞骨架参与瞬时和持续抑制作用的表达。然而，目前尚不清楚微管聚合和解聚如何参与从受体刺激到表达抑制作用的过程。在这项研究中，我们旨在通过检查已知控制微管细胞骨架聚合和解聚的哪些信号因子与毒蕈碱受体相关来阐明这一点。 1.磷脂酶C和D抑制剂渥曼青霉素和D609对表达的抑制有瞬时抑制和持续抑制两种。 2.非选择性蛋白激酶抑制剂星形孢素和酪氨酸激酶抑制剂金雀异黄素对瞬时和持续抑制的表达无影响。 3.瞬时抑制是由肌醇三磷酸从细胞内储存中释放Ca 2+ 引起的。破坏微管的秋水仙碱抑制瞬时抑制的表达而不影响Ca 2+ 从储存中的释放。 4.持续抑制的表达也受到秋水仙碱处理的抑制。紫杉醇可聚合微管，抑制 Ca 通道电流。紫杉醇促进Ca通道电流的失活过程，使失活曲线向超极化侧移动，类似于毒蕈碱受体刺激产生的强直抑制。这些结果表明磷脂酶活化参与瞬时和持续抑制作用的表达，并且从储存中释放的Ca 2+ 参与瞬时抑制的表达途径。据认为微管参与通道抑制。机制，并且持续抑制是由微管聚合引起的。上述结果在日本兽医学会第124届年会和日本药理学会第71届年会上发表，并已总结为目前正在提交的两篇论文。