大腸癌肝転移に関与するMUC1ムチン分子の機能解析

MUC1粘蛋白分子参与结直肠癌肝转移的功能分析

基本信息

批准号：
08770370
负责人：
牧口祐介
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770370/
关键词：
MUC1ムチン糖鎖大腸癌転移

项目摘要

本研究では、ムチン分子上の糖鎖が転移に対してどのような効果を持つか検討するため、まず、MUC1ムチンを発現していない大腸癌細胞株大腸癌細胞株CHCY1及び胃癌細胞株MKN7 4にMUC1 cDNAを導入したトランスフェクタントを作製し、これらの細胞株にBenzyl-α-GalNAcによる脱糖鎖処理を加えた状況での各細胞株の機能を、脱糖鎖処理を行わないMUC1トランスフェクタントおよび親細胞株と比較検討を行った。まずレクチンを用いたフローサイトメトリーにより、MUC1トランスフェクタントの末端糖鎖の検討を行なった。その結果、これらの消化器癌細胞株では、MUC1のcDNAを導入することによりトランスフェクタントの細胞表面上に末端がLeX型の糖鎖の発現が増強することが明らかとなった。また、このLeX型糖鎖はBenzyl-α-GalNAcによる脱糖鎖処理によってその発現は減弱した。次にin vitroでの細胞の運動能およびマトリゲルへの浸潤能を検討した。MUC1のcDNAを導入することによりいずれのトランスフェクタントにおいても、細胞の運動能および浸潤能が増強し、これらの細胞株にBenzyl-α-GalNAcによる脱糖鎖処理を加えることにより、増強された運動能、浸潤能は減弱した。また、これらのトランスフェクタントをヌードマウス皮下に移植し、生体内での浸潤能を検討したところ、局所的浸潤が、MUC1トランスフェクタントで高頻度で観察され、in vitroでの実験結果と矛盾しない結果が得られた。以上の結果より、腫瘍細胞上のMUC1分子はin vitroおよびin vivoにおいて腫瘍細胞の運動浸潤能を高めていることが示唆され、特にMUC1上の糖鎖がその機能に強く関与していることが伺われた。

在本研究中，为了研究粘蛋白分子上的糖链对转移的影响，我们首先研究了不表达MUC1粘蛋白的结直肠癌细胞系CHCY1和胃癌细胞系MKN74。制备导入了cDNA的转染子，并使用未进行去糖基化处理的MUC1转染子来评价经Benzyl-α-GalNAc去糖基化处理后的各细胞系的功能与定量体和亲本细胞系进行比较研究。首先，我们使用凝集素通过流式细胞术研究了 MUC1 转染子的末端糖链。结果表明，在这些胃肠道癌细胞系中，MUC1 cDNA 的引入增强了转染子细胞表面 LeX 末端糖链的表达。此外，该 LeX 型糖链的表达通过 Benzyl-α-GalNAc 的去糖基化处理而减弱。接下来，我们在体外检查了细胞运动性和对基质胶的浸润能力。引入MUC1 cDNA增强了所有转染子的细胞运动和侵袭能力，并且用Benzyl-α-GalNAc向这些细胞系添加去糖基化增强了运动和侵袭能力，但运动和侵袭能力下降。此外，当将这些转染子皮下移植到裸鼠体内并检查其体内浸润能力时，观察到MUC1转染子更频繁地观察到局部浸润，这与体外实验结果一致。上述结果表明，肿瘤细胞上的MUC1分子在体外和体内增强肿瘤细胞的运动和侵袭能力，并且MUC1上的糖链尤其强烈参与其功能。