神経芽腫細胞株(SK-N-SH)における癌幹細胞同定への試み

尝试鉴定神经母细胞瘤细胞系 (SK-N-SH) 中的癌症干细胞

• 批准号: 25931037
• 负责人: 林 陽子
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25931037/
• 关键词: 神経芽腫; 癌幹細胞; SK-N-SH

神経芽腫は胎生期の神経堤細胞neural crest cellを由来とする小児の固形悪性腫痛である。悪性度の高い神経芽腫において癌幹細胞の存在が提唱されているが同定には至っていない。また、神経芽腫ではその形質によりS、I、Nと3つのタイプに分類され、特にIタイプにおいて癌幹細胞との関係を示唆する報告がなされている。我々は不均一な細胞群からなるSK-N-SH細胞を用い、癌幹細胞の同定と分離を目的に研究を行った。貝体的には、3タイプそれぞれに相当するクローンを作成し、特にこれまでの実験において幹細胞性を示すことを確認しているIタイプのクローンについて、他2つのクローンとの差異を調べることで、癌幹細胞同定を試みた。これまでの研究で, CD44、CD133が神経芽腫の癌幹細胞マーカー候補としてあげられたが、これらだけでは、癌幹細胞群を特異的に分離することができなかったため、さらに癌幹細胞群を特定するためのマーカーを探すべく、S, I, Nタイプの表面マーカー発現様式を網羅的に探索したところ、Iタイプ特果的な発現を確認し、多くのマーカー候補を得た。さらに、得られた表面マーカー発現解析の結果をこれまでに行ったSK-N-SH細胞のクローン間での遺伝子発現解析(Iタイプ特異的な遺伝子発現の解析)および実際の臨床症例での遺伝子発現解析(予後不良群に特異的な遺伝子発現の解析)の結果と重ね合わせて解析することで、癌幹細胞同定のための表面マーカー候補の絞り込みを行うことができた。また、遺伝子発現解析の結果、悪性度の高い神経芽腫とWnt/β-catenin、PDGF, CD38系, IL-6, STAT, TGF-βシグナル系との関連が示され、癌幹細胞同定のための分子マーカー候補が得られた。今後は得られたマーカー候補の有用性を確かめるべく、SK-N-SH以外の神経芽腫細胞株も用いて更なる検討を行い、癌幹細胞同定を目指す予定である。

神经母细胞瘤是一种起源于胚胎神经嵴细胞的儿童实体恶性肿瘤。有人提出高度恶性的神经母细胞瘤中存在癌症干细胞，但尚未得到证实。此外，神经母细胞瘤根据其特征分为三种类型：S、I和N，并且已有报告表明与癌症干细胞，特别是I型干细胞的关系。我们进行了研究，使用 SK-N-SH 细胞（一种异质细胞群）来识别和分离癌症干细胞。就贝类而言，我们创建了与这三种类型相对应的克隆，并特别检查了在之前的实验中已被证实表现出干细胞特性的I型克隆与其他两种克隆之间的差异，试图进行识别。癌症干细胞。先前的研究建议CD44和CD133作为神经母细胞瘤的候选癌症干细胞标志物，但仅靠这些还不能特异性分离癌症干细胞群，因此需要进一步鉴定癌症干细胞群以寻找标志物。为此，我们全面检索了S、I、N型表面标记的表达模式，找到了I型特有的表达，获得了许多候选标记。此外，我们将获得的表面标记表达分析结果应用于SK-N-SH细胞克隆之间的基因表达分析（I型特异性基因表达分析）以及实际临床病例中的基因表达。通过表达分析（针对不良预后群体的基因表达分析），我们能够缩小用于识别癌症干细胞的表面标记候选者的范围。此外，基因表达分析显示高度恶性的神经母细胞瘤与Wnt/β-catenin、PDGF、CD38系统、IL-6、STAT和TGF-β信号系统之间存在关系，这对于识别癌症干细胞候选分子标记物很有用。获得。未来，为了确认所获得的候选标志物的有用性，我们计划使用SK-N-SH以外的神经母细胞瘤细胞系进行进一步的研究，目的是鉴定癌症干细胞。

项目成果

Identification of Cancer Stem Cell Markers in Heterogeneous Neuroblastoma Cell Lines.

异质神经母细胞瘤细胞系中癌症干细胞标志物的鉴定。

• 发表时间: 2013
• 作者: Uranbileg B;Soroida Y;et;al.;田中 克宜;田中 克宜;長谷川 陽子;長谷川 陽子;山田 将臣;岩谷 知美;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;監修 : 日本生理学会教育委員会(分担執筆);林 陽子
• 通讯作者: 林 陽子

Identification of Marker of Cancer Stem Cells in Neuroblastoma Cell Line SK-N-SH

神经母细胞瘤细胞系 SK-N-SH 中癌症干细胞标志物的鉴定

• 发表时间: 2013
• 作者: Uranbileg B;Soroida Y;et;al.;田中 克宜;田中 克宜;長谷川 陽子;長谷川 陽子;山田 将臣;岩谷 知美;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;濵田 悦子;監修 : 日本生理学会教育委員会(分担執筆);林 陽子;林 陽子
• 通讯作者: 林 陽子