骨損傷時の神経発芽と痛みのメカニズムの解析

骨损伤时神经萌发及疼痛机制分析

基本信息

批准号：
20929028
负责人：
安井正佐也
金额：
$ 0.37万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20929028/
关键词：
骨折痛神経線維神経成長因子

项目摘要

【目的】骨折痛の基本概念の確立を目的に、独自に開発した骨損傷モデル(ラット脛骨に骨孔を作製することで固定の影響を除外した骨損傷モデル)に対して、骨損傷治癒期間中の限局性圧痛の変化を行動学的実験で評価し、骨折部の神経分布の変化を明らかにする。また、骨損傷後に神経線維の増加や痛覚の感作を引き起こすと考えられる神経栄養因子(NGF)について、その拮抗薬を用いて行動薬理学的実験で圧痛に関連するメディエーターであるか調べる。【方法】ラットの脛骨に、1)皮膚、骨膜を切開しドリルで骨孔を開けた骨損傷群、2)皮膚、骨膜切開を行った骨膜切開群、3)皮膚切開のみ行った皮膚切開群、の3群を作製し、損傷部の機械刺激に対する逃避行動を観察した。また、治癒経過をHE染色にて観察し、免疫組織化学的に標識した神経線維の長さを計測した。さらにNGFの損傷部での発現を免疫組織化学的に標識して確認し、NGF中和抗体とNGF受容体であるTrkAの阻害薬(K252a)を損傷部へ投与し痛覚の変化を観察した。【成果】圧痛は骨損傷群で28日間、骨膜切開群で21日間、皮膚切開群で5日間、観察され、骨損傷群と骨膜切開群は長期間圧痛が見られた。骨再生期間は骨損傷群で28日間、骨膜切開群で21日間であった。神経分布の変化は、損傷後7日目において骨膜切開群の皮膚にGAP43陽性神経線維が一過性に増加しており、損傷後28日目において骨損傷群の仮骨及び骨膜にCGRP,TH,GAP43陽性神経線維が著しく増加していた。NGF中和抗体およびNGF受容体であるTrkAの阻害薬(K252a)は骨損傷群の7日目および28日目の圧痛を抑制した。したがって、骨折治癒期間中の骨再生期間と一致して圧痛があり、その期間中には神経線維の増生およびNGFの発現が認められた。NGFの拮抗薬を用いて、圧痛が抑制できた事から、骨損傷時の痛みには、骨の治癒過程と、神経線維の発芽が関与しており、NGF-TrkAを介する知覚神経の感作が示唆された。

[目的] 为了建立骨折疼痛的基本概念，我们研究了独特开发的骨损伤模型（通过在大鼠中创建骨孔来排除固定影响的骨损伤模型）的骨损伤愈合时间。我们将使用行为实验评估骨折区域内局部压痛的变化，并阐明骨折部位神经分布的变化。此外，我们将使用其拮抗剂在行为药理学实验中研究神经营养因子（NGF）是否是与压痛相关的介质，神经营养因子被认为会导致骨损伤后神经纤维的增加和疼痛敏化。 [方法] 骨损伤组，其中切开皮肤和骨膜并用钻头钻出骨孔，2）骨膜切开组，其中切开皮肤和骨膜，3）皮肤切开组，其中仅皮肤被切开，并观察它们对受伤区域的机械刺激的逃避行为。此外，通过HE染色观察愈合过程，并测量免疫组化标记的神经纤维的长度。此外，通过免疫组织化学标记确认损伤部位的NGF表达，并对损伤部位给予NGF中和抗体和NGF受体TrkA(K252a)抑制剂，观察伤害感受的变化。 [结果]骨损伤组压痛观察时间为28天，骨膜切开组为21天，皮肤切开组为5天，骨损伤组和骨膜切开组压痛观察时间较长。切口组。骨损伤组骨再生期为28天，骨膜切开组骨再生期为21天。神经分布变化包括伤后第7天骨膜切开组皮肤中GAP43阳性神经纤维短暂增加，伤后第28天骨伤组愈伤组织和骨膜中CGRP、TH短暂增加。 ,GAP43阳性神经纤维明显增多。 NGF 中和抗体和 NGF 受体 TrkA (K252a) 抑制剂可抑制骨损伤组第 7 天和第 28 天的压痛。因此，压痛恰逢骨折愈合过程中的骨再生期，在此期间观察到神经纤维的增殖和NGF的表达。由于使用 NGF 拮抗剂可以抑制压痛，因此骨损伤引起的疼痛与骨愈合过程和神经纤维的萌发有关，并且建议通过 NGF-TrkA 使感觉神经敏化。