開口分泌におけるCa^<2+>シグナルとCa^<2+>放出チャネル

胞吐作用中的 Ca^<2+> 信号和 Ca^<2+> 释放通道

基本信息

批准号：
13770028
负责人：
伊藤公一
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞内Ca^<2+>シグナルは全ての細胞における様々な生理機能に重要である。動物細胞にはIP_3受容体と共にもう一つの細胞内Ca^<2+>ストアのCa^<2+>放出チャネルであるリアノジン受容体が存在し、特に筋細胞などでは興奮収縮連関において非常に重要な役割を果たしている。しかしながら膵臓外分泌腺細胞においてはリアノジン受容体の存在は明確に示されておらず、分子レベルでの解明には至っていない。本申請研究では膵臓外分泌腺細胞の分泌機能におけるリアノジン感受性細胞内ストアの役割を詳細に明らかにし、さらに総合的に細胞内Ca^<2+>ストアの役割を明らかにすべく小胞体上に発現している分子として知られているJunctophilin(JP)の機能解析を行うことを目的としている。まず昨年遺伝子クローニングされたJPの1型(JP-l)の機能解析を行うことからはじめた。このためJP-1遺伝子欠損マウス(JP-1 KOマウス)を作製、観察したところJP-1 KOマウスは授乳されることなく生後一日以内に死亡することが確認された。さらにJP-1が豊富に発現している骨格筋を用いて形態観察や、筋電図や張力測定などの生理学的解析を行ったところ、骨格筋における三ツ組構造の数が滅少しており、収縮力が弱まっていることや強い細胞外Ca^<2+>依存性をもつことが明らかになった。これらよりJP-1は骨格筋における三ツ組構造の形成や効率的な興奮収縮連関に必須の分子であることが示唆された。この結果はJournal of Cell Biologyに受理、掲載された(JCB,154(5),1059-1067,2001)。これらの結果をもとに、膵臓外分泌腺細胞において細胞内Ca^<2+>ストアの役割を理解すべくリアノジン受容体とJPの局在を調べる予定であったが、申請者の海外留学の決定のため申請研究は以上の結果をもって終了となった。

细胞内Ca 2+ 信号对于所有细胞的各种生理功能都很重要。除IP_3受体外，动物细胞还具有兰尼碱受体，它是细胞内Ca^2+储存的Ca^2+释放通道，在兴奋-收缩耦合中极其重要，尤其在肌肉细胞中发挥着重要作用。角色。然而，兰尼碱受体在外分泌胰腺细胞中的存在尚未得到明确证明，并且兰尼碱受体尚未在分子水平上得到阐明。在本研究中，我们将详细阐明兰尼碱敏感的细胞内储存在外分泌胰腺细胞的分泌功能中的作用，并进一步全面阐明在内质网上表达的细胞内Ca^2+储存的作用目的。这项研究的目的是对亲粘蛋白 (JP) 进行功能分析，已知它是一种具有分子功能的分子。首先，我们首先对去年克隆的 JP 1 型（JP-1）基因进行了功能分析。因此，制作并观察了JP-1基因缺陷小鼠（JP-1 KO小鼠），结果确认JP-1 KO小鼠在未哺乳的情况下在出生一天内死亡。此外，当我们使用JP-1大量表达的骨骼肌进行形态学观察和生理分析（例如肌电图和张力测量）时，我们发现骨骼肌中的三联结构的数量极少，从而揭示了收缩力。减弱，并且对细胞外Ca^2+有很强的依赖性。这些结果表明，JP-1 是骨骼肌三联体结构形成和有效兴奋-收缩耦合的重要分子。该结果被《细胞生物学杂志》接受并发表（JCB, 154(5), 1059-1067, 2001）。基于这些结果，我们计划研究兰尼碱受体和JP的定位，以了解细胞内Ca^2+储存在外分泌胰腺细胞中的作用，但申请人决定出国留学，因此，本申请研究被搁置。得出上述结果。