哺乳動物における相同組換え遺伝子と細胞周期チェックポイントに関する研究

哺乳动物同源重组基因和细胞周期检查点的研究

基本信息

批准号：
12780515
负责人：
吉田佳世
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780515/
关键词：
Dmc1遺伝子 p53遺伝子ダブルノックアウトマウスアポトーシス

项目摘要

有性生殖生物において、相同組換えはDNA切断を修復し遺伝情報を正確に伝える機能をもっている。さらに、減数分裂期には相同組換えは遺伝的に多様な配偶子を形成するという重要な役割を担っている。このように相同なDNAの配列を認識し、組換えを触媒するタンパクとして大腸菌相同組換え遺伝子RecAが知られている。我々は、哺乳動物のRecA遺伝子のホモログであるDmc1遺伝子のターゲッティングから、Dmc1遺伝子が減数分裂期の相同染色体の対合に必要で、その欠損は減数分裂の停止とアポトーシスを導くことを明らかにした(Mol. Cell 1,707-718,1998)。このように、高等真核生物において組換え遺伝子は、DNA修復や染色体の対合、組換えに必須であるだけでなく、細胞周期の調節と深く関わっていることを明らかにした。さらに精巣のタンパクを用いて、免疫沈降したところ、抗DMC1抗体によってp53タンパクが、また抗p53抗体によってDMC1タンパクが共沈することを明らかにした。そこで、Dmc1遺伝子とp53遺伝子のダブルノックアウトのマウスを作製し、減数分裂における細胞周期の停止とアポトーシスがp53遺伝子の欠損により、チェックポイント機能が作用せず遅延するか検討した。その結果、p53遺伝子の有無に係わらず、Dmc1欠損に伴う減数分裂の停止とアポトーシスは、起こり両者で差がないことが明らかとなった。このことから、相同染色体の対合不全に伴うアポトーシスがp53遺伝子の経路を介さず、新たな経路があることを明らかにした。

在性生殖生物中，同源重组具有修复DNA切割并准确传达遗传信息的功能。此外，在减少时期，同源重组在遗传形成各种美食方面起着重要作用。 LECA大肠杆菌被称为识别DNA排列并识别重组的蛋白质。我们已经从DMC1基因的靶向哺乳动物RECA基因的同源物中阐明了DMC1基因在十进制期间对这对同源染色体是必需的，并且缺陷将停止减少并导致细胞凋亡。这样，很明显，高欧纳生物中的重组基因不仅对于DNA恢复，染色体对和重组至关重要，而且还与调节细胞周期深深相关。另外，使用睾丸蛋白显示免疫植物体，并显示了抗-DMC1抗体，显示抗-p53抗体在DMC1蛋白中下沉p53蛋白。因此，制备了DMC1基因和p53基因的双重敲除小鼠，并检查了由于p53基因中p53基因缺乏而没有检查点功能的pointpoint函数是否延迟了。结果，发现由于p53基因引起的DMC1缺乏和凋亡引起的减少和凋亡的停止没有差异。这表明与议会染色体相关的细胞凋亡在没有穿过p53基因途径的情况下具有新的途径。