細胞分化とアポトーシスを制御する細胞内情報伝達経路の解析

控制细胞分化和凋亡的细胞内信号通路分析

• 批准号: 09780668
• 负责人: 八尾 良司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780668/
• 关键词: アポトーシス; Pl3-kinase; Akt; GSK-3β; β-カテニン

これまでに本研究では受容体チロシンキナーゼの活性化によるアポトーシスの抑制にはPI3-kinaseおよびその下流分子であるAktセリンスレオニンキナーゼが重要な役割を果たしていることを示してきた。さらにBadのAktによるリン酸化はこのアポトーシス抑制機構の重要なステップであることも示されている。一方Aktの基質としてWntシグナルの構成分子であるGSK-3βが同定されている。GSK-3βは、β-カテニンをリン酸化することによりその分解を促進することが知られているので、β-カテニンのアポトーシス制御における役割を検討した。野生型β-カテニン遺伝子およびそのGSK-3βによるリン酸化部位に変異を導入した活性型β-カテニン遺伝子さらに核移行シグナルを導入した核移行活性型β-カテニン遺伝子を用い、それぞれの遺伝子を我々の樹立した子宮頚癌由来細胞株に導入し一過性に発現させたところ、アポトーシスに特徴的な染色体凝集像が観察された。またコロニーフォーメーションアッセイにおいては、顕著なコロニー形成率の低下が見られた。これらの結果は、β-カテニンの高発現によりアポトーシスが誘導されることを示している。さらにその活性は、核移行活性型、活性型、野生型の順で高かったことから、GSK-3βにより制御される活性と核への移行がβ-カテニンのアポトーシス誘導に重要であることが示唆される。現在β-カテニンにより活性が制御されているTCF/lef転写因子のアポトーシス誘導活性への関与を検討している。またAktによるアポトーシス防止機構にはBadが関与していることから、Badとβ-カテニンによるアポトーシス誘導との関係も興味深い問題である。

迄今为止，这项研究表明，PI3-激酶及其下游分子Akt丝氨酸苏氨酸激酶在通过激活受体酪氨酸激酶抑制凋亡中起重要作用。此外，已经表明，不良的Akt磷酸化是这种抑制凋亡机制的重要一步。另一方面，Wnt信号的组成分子GSK-3β已被确定为Akt的底物。由于已知GSK-3β通过β-catenin的磷酸化促进其降解，因此研究了β-catenin在调节细胞凋亡中的作用。野生型β-catenin基因和活性β-catenin基因通过GSK-3β将突变引入磷酸化位点，并使用了核易位 - 活性β-catenin基因，这些基因引入了核转运信号，使用了核转运信号，每个基因都引入了我们的cervical Cell线，并导致了cervical cancer-dedrigation contriend cyregrient contriend contriend contriend contriented chrositightient contriented Arignitional contriented Anigation in a contriented Anignitional in trigation in the and a in of cy。凋亡的特征。此外，在菌落形成测定中，观察到菌落形成率显着降低。这些结果表明，β-catenin的高表达诱导凋亡。此外，该活性在核易位，主动和野生型的顺序上较高，这表明GSK-3β调节的活性和核易位对于诱导β-catenin凋亡非常重要。我们正在研究目前由β-catenin调节的TCF/LEF转录因子的参与，这些因子在凋亡诱导活性中。此外，AKT预防细胞凋亡的机制，因此β-catenin对凋亡的凋亡与凋亡的诱导之间的关系是一个有趣的问题。

项目成果

R.Yao, M.Yoshihara et al.: "Specific activation of a c-Jun NH2-terminal kinase isoform and induction of neurite outgrowth in PC-12 cells by staurosporine." J.Biol.Chem.272. 18261-18266 (1997)

R.Yao、M.Yoshihara 等人：“星形孢菌素特异性激活 c-Jun NH2 末端激酶亚型并诱导 PC-12 细胞中的神经突生长。”

H.Dudek, R.Yao et al.: "Regulation of neuronal survival by the serine-threonine kinase Akt." Science. 275. 661-665 (1997)

H.Dudek、R.Yao 等人：“丝氨酸-苏氨酸激酶 Akt 对神经元存活的调节”。