新規加齢性B細胞サブセットの解析による免疫老化メカニズムの解明

通过分析新型年龄相关 B 细胞亚群阐明免疫衰老机制

• 批准号: 22K15497
• 负责人: 畑野 晋也
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15497/
• 关键词: B細胞; 加齢性B細胞; 自己免疫疾患; 液性免疫老化; 免疫老化; 自己抗体

B細胞は生体防御のなかでも抗体産生など液性免疫の要となる細胞であるが、老化により液性免疫応答が低下する（液性免疫老化）ことが知られている。その原因や、老化に伴いB細胞の分化や機能がどのように変化するのかは不明である。加齢に伴い増加する特殊なB細胞サブセットとして、加齢性B細胞が報告されているが、加齢性B細胞サブセットを規定するマーカーは詳細に同定されていないため、加齢性B細胞の機能や性状、BCRの多様性は不明である。申請者は予備実験として、若齢マウスB細胞では発現しないが老化マウスB細胞にて高く発現する新たな加齢生B細胞マーカー候補の遺伝子X(未発表のためXとする)を同定している。本研究の目的はB細胞における遺伝子Xの機能を解明することによって、老化によって誘導される液性免疫老化を引き起こす機序を解明することである。まず研究研計画に挙げている遺伝子X発現加齢性B細胞サブセットの同定のために、遺伝子X発現B細胞を詳細に解析した。その結果、遺伝子X発現B細胞において細胞表面発現が高いタンパク質を数個同定した。また遺伝子X発現B細胞は自己免疫疾患に関与するTLR7やTLR9の発現が高いこと、メモリーマーカーが高いことなどの特徴を同定した。次に遺伝子X発現B細胞の機能解析に関して、まず若齢マウス脾臓のB細胞をin vitroにて加齢性B細胞誘導刺激を行なった。その結果、加齢性B細胞サブセットの誘導共にXの発現が誘導されることがわかった。そこで、遺伝子X欠損マウスの脾臓B細胞において、加齢性B細胞誘導刺激実験を行なった結果、野生型マウスB細胞と比較して、誘導された加齢性B細胞の減少が観察された。さらに遺伝子X欠損加齢マウスの脾臓B細胞を解析した結果、加齢性B細胞数が野生型加齢マウスと比較して減少した。これらの結果からXは加齢性B細胞分化誘導に関与する可能性が示唆された。

B细胞已知是液体免疫的最常见细胞，例如抗体的产生，但已知可以降低液体免疫反应（液体免疫老化）。尚不清楚原因以及B细胞分化和功能如何由于老化而变化。据报道，与衰老的特殊B细胞子群报道，但规定老化B细胞子群的标记物详细确定，因此它是衰老的B细胞。作为一个初步实验，申请人确定了新的老化B细胞标记候选遗传X（不发表），该基因在年轻的小鼠B细胞中不表达，而是在老化的小鼠B细胞中表达。这项研究的目的是阐明通过阐明遗传X在B细胞中的遗传X功能而引起的液体免疫老化的机制。首先，为了确定研究计划中列出的基因X表达衰老B细胞子集，详细分析了基因X表达B细胞。结果，在遗传X表达B细胞中鉴定了几种具有高细胞表面表达的蛋白。此外，遗传X表达B细胞已经鉴定出特征，例如参与自身免疫性疾病的TLR7和TLR9的高表达和高记忆标记。接下来，关于遗传X表达B细胞的功能分析，小鼠脾脏的B细胞首先是通过体外进行的，以诱导衰老B细胞。结果，发现在衰老B细胞子群的诱导中都诱导X的表达。因此，由于在基因X缺陷型小鼠的脾脏B细胞中进行衰老B细胞诱导刺激实验，与野生小鼠B细胞相比，观察到诱导的老化B细胞的降低。此外，由于分析了遗传X缺陷型老化小鼠的脾脏B细胞，与野生型老化小鼠相比，老化B细胞的数量减少。这些结果表明X可能参与衰老B细胞分化的诱导。