チョウ目昆虫におけるウイルス性オス殺しの分子機構解明

阐明病毒杀死鳞翅目昆虫雄性的分子机制

• 批准号: 22K14903
• 负责人: 長峯 啓佑
• 金额: $ 3万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K14903/
• 关键词: オス殺し; ウイルス; 昆虫; 共生; 共生微生物; 昆虫ウイルス

昆虫では，細胞内共生微生物がオス宿主を特異的に死亡させる“オス殺し”が多数報告されているが，オス殺しのほとんどは細菌によるものでウイルスによる事例は非常に珍しく，ウイルス性オス殺しの分子機構はほとんど分かっていない．ハスモンヨトウから見つかったオス殺しウイルス（SlMKV）のゲノム解析を行った結果，ゲノム上には僅か7つの遺伝子しかコードされていないことが明らかになった．そこで本研究では，ReMOT法を応用したハスモンヨトウを用いた機能解析と，遺伝子組換えカイコを用いた機能解析により，7つのウイルス遺伝子からオス殺し遺伝子を特定する．本年度は，ReMOT法を応用したハスモンヨトウを用いた機能解析を行うため，卵移行ペプチドを付加した組換えウイルスタンパク質の精製を行い，7つのウイルスタンパク質うち3つの精製に成功した．次年度はこれら組換えタンパク質を宿主であるハスモンヨトウ成虫に投与し，機能解析を行う．また，各ウイルス遺伝子を組込んだ7つの組換えカイコ系統を作出した．次年度は，組換えカイコでウイルス遺伝子を強制発現させることで，オス殺しを誘起する遺伝子を特定する．

在昆虫中，已经报道了许多内共生微生物特异性杀死雄性宿主的“雄杀”案例，但大多数雄杀案例是由细菌引起的，由病毒引起的案例极为罕见，其分子机制很大程度上尚不清楚。对日本斜纹夜蛾中发现的雄性致死病毒（SlMKV）的基因组分析表明，其基因组中仅编码七个基因。因此，在本研究中，我们将通过使用ReMOT方法对日本斜纹夜蛾进行功能分析和使用转基因蚕进行功能分析，从7个病毒基因中鉴定雄性杀伤基因。今年，我们利用ReMOT法，利用三叶夜蛾进行功能分析，纯化了添加卵转运肽的重组病毒蛋白，成功纯化了7种病毒蛋白中的3种。明年，我们将把这些重组蛋白注射到宿主大斜纹夜蛾中并进行功能分析。我们还创建了七个包含每种病毒基因的重组蚕品系。明年，我们将通过迫使重组蚕中的病毒基因表达来鉴定诱导雄性死亡的基因。