血中T-カドヘリンの存在様式と生理的意義の解明

血液中T-钙粘蛋白的存在方式及生理意义的阐明

基本信息

批准号：
21K16340
负责人：
福田士郎
金额：
$ 3万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者は、脂肪細胞特異的分泌因子アディポネクチンと特異的に結合する膜タンパク質であるT-カドヘリン(T-cad)について、その可溶型フォームの血中濃度制御・動態ならびに生理的・病態的意義について研究している。今年度は以下の検討を行った。(1) 可溶型T-cadの生成・動態：膜型のT-カドヘリンを発現しているマウス血管内皮細胞株や初代ヒト血管内皮細胞を培養し、様々な添加物を処理しその培地上清をT-cad ELISAで解析した。その結果、ケトン体を添加した際に培地中の可溶型100kDa体T-cadが増加した。しかしケトン体を添加することにより培地のpHが酸性に傾いてしまい、これが細胞に影響を与えた可能性を考慮し、ケトン体のナトリウム塩を用いて再検討する。(2) 可溶型T-cadの機能：マウスを用いた検討で、血中T-cad濃度は高脂肪食による肥満モデルで低下し、ストレプトゾシンによる高血糖状態で増加することを明らかにした。さらに、可溶型T-cadを投与したマウスでは、高血糖状態においてNotch経路の活性化を介して膵β細胞の増殖作用を発揮することを明らかとした[Okita, Kita, Fukuda et al. iScience 2022]。(3) ヒト血中T-cad濃度の検討：ST上昇型心筋梗塞患者では、経時的かつダイナミックに血中T-cad濃度が変化することを明らかにした[Iioka, Fukuda et al. JAT 2022]。一方、ヒトにおける血中T-cad濃度の「基準値」は不明である。そこで、人間ドック施設を有する学外病院と共同研究を締結し、人間ドック受診者が採血検査を受けた際の残余血清を回収し、その血中T-カドヘリン濃度を測定し、各種臨床パラメータとの相関を検討する。

申请人将研究可溶形式的T-钙粘蛋白（T-cad）的血液浓度控制和动力学，T-钙粘蛋白是一种与脂肪细胞特异性分泌因子脂联素特异性结合的膜蛋白，以及其生理和病理意义。研究有关.今年，我们考虑了以下事项。 (1)可溶性T-cad的产生和动态：培养表达膜型T-钙粘蛋白的小鼠血管内皮细胞系和原代人血管内皮细胞，用各种添加剂处理，然后对培养上清液进行分析。通过 T-cad ELISA。结果，当添加酮体时，培养基中可溶性100kDa T-cad增加。然而，通过添加酮体，培养基的pH值变成酸性，考虑到这可能影响细胞的可能性，我们将重新考虑使用酮体的钠盐。 (2)可溶性T-cad的功能：使用小鼠进行的研究表明，在高脂肪饮食诱导的肥胖模型中，血液中的T-cad浓度降低，而在链脲佐菌素诱导的高血糖状态下，血液中的T-cad浓度升高。此外，研究表明，给予可溶性 T-cad 的小鼠在高血糖条件下通过激活 Notch 通路对胰腺 β 细胞产生增殖作用 [Okita, Kita, Fukuda et al. 2022]。 (3)人体血液T-cad浓度的检查：研究表明，ST段抬高型心肌梗死患者的血液T-cad浓度随时间动态变化[Iioka, Fukuda et al. 2022]。另一方面，人类血液T-cad浓度的“标准值”尚不清楚。因此，我们与一家拥有综合体检设施的校外医院开展了一项联合研究项目。我们从体检采集的血液样本中收集剩余血清，测量血液中T-钙粘蛋白浓度，并研究与考虑各种临床参数。