CD47-SIRPα結合阻害特殊環状ペプチドによる革新的免疫療法の開発

使用抑制 CD47-SIRPα 结合的特殊环肽开发创新免疫疗法

基本信息

批准号：
21K16119
负责人：
羽間大祐
金额：
$ 3万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

CD47とSignal regulatory protein α（SIRPα）で形成される細胞間シグナルCD47-SIRPα系は、腫瘍細胞の生体からの排除を抑制する免疫チェックポイントとして機能する。そのため、マウスSIRPαに特異的に結合してCD47-SIRPα系を阻害する特殊環状ペプチドを開発した。本ペプチドは、腫瘍特異抗体を介したマクロファージの貪食作用を促進し、腫瘍特異抗体による抗腫瘍効果の増強作用を示した。そこで本研究では、本ペプチドが免疫チェックポイント阻害剤（ICI）の抗腫瘍効果を増強するのかを評価するとともに、本ペプチドの経静脈投与だけでなく吸入投与でも同様の効果が得られるかを検討する。本ペプチドとICIの併用で優れた治療効果を示すことができれば、今後ヒトSIRPαを標的とした特殊環状ペプチドを開発することにより、安価で副作用の少ない新たなICIが得られる可能性がある。2022年度は、肺がん細胞に対するPD-L1抗体への、SIRPα阻害薬の上乗せ効果に関する実験を行った。すなわち、マウスの骨髄由来マクロファージおよびLLCで4時間培養し、PD-L1抗体、MY-1(SIRPα阻害薬) の有無で4群に分けた。4時間の培養後、FACSで貪食率を調べた。しかし、PD-L1抗体、SIRPα抗体の有無にかかわらず、マクロファージはLLCを貪食しなかった。そこで、インターフェロンγ(10ng/mlおよび100ng/ml)とLLCを48時間、あるいは72時間培養することで、インターフェロンγ 100ng/ml で72時間培養した後が、最もPD-L1の発現率が高いことが確認できた。

由CD47和信号调节蛋白α（SIRPα）形成的细胞间信号CD47-SIRPα系统是一种免疫检查点，可抑制从生物体中排除肿瘤细胞。因此，开发了一种特异性结合并抑制CD47-SIRPα系统的特殊环状肽。该肽通过肿瘤特异性抗体促进巨噬细胞吞噬作用，并证明肿瘤特异性抗体的抗肿瘤作用增强。因此，在这项研究中，我们将评估该肽是否增强了免疫检查点抑制剂（ICI）的抗肿瘤作用，并检查是否不仅可以通过静脉内给药，还可以通过吸入来获得类似的效果。如果该肽和ICI的组合可以表现出极好的治疗作用，则可以通过开发针对人类SIRPα的特殊循环肽来获得新的ICI，并具有廉价的副作用，副作用较少。在2022年，我们进行了一项实验，以实验SIRPα抑制剂对针对肺癌细胞的PD-L1抗体的添加作用。也就是说，将细胞与小鼠的骨髓来源巨噬细胞和LLC培养4小时，并根据PD-L1抗体和MY-1（SIRPα抑制剂）的存在或不存在四组。孵育4小时后，使用FACS检查了吞噬作用率。然而，巨噬细胞没有或没有PD-L1或SIRPα抗体的吞噬剂LLC。因此，通过孵育干扰素γ（10 ng/ml和100 ng/ml）和LLC 48或72小时，可以证实，在以100 ng/mL的培养子γ孵育后，达到了最高的PD-L1表达速率72小时。