加齢による肝線維化進展促進に関わる新たな因子の同定とその分子学的メカニズム

促进衰老肝纤维化进展的新因子的鉴定及其分子机制

• 批准号: 21K15983
• 负责人: 西村 典久
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15983/
• 关键词: CHI3L1; 肝星細胞; 肝線維化; 加齢性変化; 肝細胞

CHI3L1の肝線維化に対する分子学的機序を解明する目的で、肝線維化の中心的役割を果たす肝星細胞に対する直接的作用の検討を行った。Primaryのヒト肝星細胞（HHSteC）および肝星細胞株であるLX-2を用い、組換え体CHI3L1蛋白を培養液に添加して培養し、細胞増殖や肝線維化マーカーの変化を解析した。CHI3L1を添加して培養を行うと、対照群と比較して有意に肝星細胞の細胞増殖が促進されていた。Ki67染色を行ったところ、CHI3L1刺激群ではKi67陽性細胞数が有意に上昇しており、細胞増殖の促進が裏付けられた。次にRT-PCRなどを用いて肝星細胞の活性化マーカーであるαSMA、COL1A1、TGF-B1などの発現を見てみると、CHI3L1は有意にαSMAやCOL1A1の発現を上昇させた。一方で、TGF-B1の発現は有意差がみられなかった。このことから、CHI3L1による肝線維化促進には古典的にその作用が確立されているTGF-B1 signalingとは独立したpathwayが関連していると考えられた。CHI3L1は、哺乳類における役割がいまだ十分に同定されておらず、結合するreceptorについても確立された報告は少ない。そこで、肝星細胞におけるCHI3L1のreceptorについて検索を行うこととした。その結果、マクロファージなどの細胞において発現が認められるIL-13 receptor α2 (IL-13Ra2)が肝星細胞に発現しており、このreceptorは肝星細胞の活性化に伴って、細胞表面に発現してくることが確認された。IL-13Ra2を介したsignalingはこれまでの報告で肝星細胞の活性化を促進し、肝線維化進展に関与していることが報告されており、肝星細胞におけるCHI3L1の直接的作用はこの系を介した作用であることが明らかとなった。これらの結果から、CHI3L1は年齢により促進される肝線維化進展の増悪因子であることが示唆された。

为了阐明CHI3L1对肝纤维化的分子机制，我们研究了其对肝星状细胞的直接影响，肝星状细胞在肝纤维化中发挥核心作用。将重组CHI3L1蛋白添加到培养基中培养原代人肝星状细胞（HHSteC）和肝星状细胞系LX-2，并分析细胞增殖和肝纤维化标志物的变化。当添加CHI3L1培养时，与对照组相比，肝星状细胞的细胞增殖显着促进。当进行Ki67染色时，CHI3L1刺激组中Ki67阳性细胞的数量显着增加，支持细胞增殖的促进。接下来，当我们使用RT-PCR检测肝星状细胞活化标志物如αSMA、COL1A1和TGF-B1的表达时，我们发现CHI3L1显着增加了αSMA和COL1A1的表达。另一方面，TGF-B1的表达没有观察到显着差异。这表明 CHI3L1 促进肝纤维化与独立于 TGF-B1 信号传导的途径有关，其作用已被经典证实。 CHI3L1 在哺乳动物中的作用尚未完全确定，并且关于 CHI3L1 结合的受体的确定报道也很少。因此，我们决定在肝星状细胞中寻找CHI3L1受体。结果，观察到在巨噬细胞等细胞中表达的IL-13受体α2(IL-13Ra2)在肝星状细胞中表达，并且随着肝星状细胞的活化，该受体在细胞表面表达。已经确定它会来。此前的报道表明，IL-13Ra2介导的信号传导促进肝星状细胞的活化并参与肝纤维化的进展，而CHI3L1对肝星状细胞的直接作用也正是因此而明确的。由系统调解。这些结果表明，CHI3L1 是肝纤维化进展的加剧因素，且随着年龄的增长而加速。

项目成果

The role of chitinase-3 like 1 on age-related liver fibrosis progression

几丁质酶3样1在年龄相关性肝纤维化进展中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 西村典久;鍛治孝祐;久保貴裕;瓦谷英人;浪﨑正;赤羽たけみ;吉治仁志
• 通讯作者: 吉治仁志